[发明专利]一种评价卷烟烟气对小鼠免疫损伤的动物模型的构建方法及其应用

权利要求书

1.一种评价卷烟烟气对小鼠免疫损伤的动物模型的构建方法，该动物模型的构建方法包括如下步骤：将实验小鼠置于密封室中，设定密封室内小鼠呼吸的卷烟烟气体积浓度为60%，1次/日，吸烟10~40min/次/日，连续吸烟30天，且8.5分≤肺部DAI值≤12.5分，得到评价卷烟烟气对小鼠免疫损伤的动物模型；

所述肺部DAI值是通过吸烟后小鼠肺部病理DAI评分体系得到的，所述吸烟后小鼠肺部病理DAI评分体系为：

肺泡完整性评分值A1，所述肺泡完整性评分值A1的范围为0-3分：肺泡完整记0分，轻度损伤记1分，中度损伤2分，重度损伤3分；

肺上皮细胞水肿评分值A2，所述肺上皮细胞水肿评分值A2的范围为0-3分：无水肿记0分，轻度水肿记1分，中度水肿记2分，重度水肿记3分；

炎症细胞浸润评分值A3，所述炎症细胞浸润评分值A3的范围为0-3分：无浸润记0分，少量浸润记1分，中度浸润记2分，大量浸润记3分；

支气管上皮完整性评分值A4，所述支气管上皮完整性评分值A4的范围为0-3分：完整记0分，轻度缺损记1分，中度缺损记2分，重度缺损记3分；

支气管水肿评分值A5，所述支气管水肿评分值A5的范围为0-3分：无水肿记0分，轻度水肿记1分，中度水肿记2分，重度水肿记3分；

以肺泡完整性评分值A1、肺上皮细胞水肿评分值A2、炎症细胞浸润评分值A3、支气管上皮完整性评分值A4与支气管水肿评分值A5之和作为肺部DAI值。

2.如权利要求1所述的动物模型在研制低毒性卷烟中的应用。

3.一种卷烟烟气对动物机体免疫损伤的评价方法，其特征在于，包括如下步骤：通过对权利要求1所述的动物模型进行机体免疫系统损伤检测，评价卷烟燃烧后的烟气对动物机体免疫系统的影响。

4.根据权利要求3所述的评价方法，其特征在于，所述机体免疫系统损伤检测包括：检测实验动物肺脏局部肺泡灌洗液中细胞量及分泌细胞因子量变化；检测实验动物肺脏免疫相关基因及分子的表达变化；检测实验动物吸烟前后免疫系统中CD4+T细胞、CD8+T细胞数量和比例的变化及T淋巴细胞中CD69、CD25、MHC II的表达情况；检测实验动物吸烟前后B细胞各亚群比例变化及吸烟前后血清中IgM、IgG、IgA、IgD、IgE的产生情况。

5.根据权利要求4所述的评价方法，其特征在于，所述肺泡灌洗液中细胞量包括巨噬细胞含量、NK细胞含量、中性粒细胞含量，所述分泌细胞因子量为炎症因子表达量，所述炎症因子包括IL-1、IL-6、TNF、hs-CRP及溶菌酶。

6.根据权利要求4所述的评价方法，其特征在于，所述免疫相关基因及分子包括巨噬细胞表达的CD40、CD80、CD86和Ia，及炎症细胞因子IL-1、IL-6和TNF-α。

7.根据权利要求4所述的评价方法，其特征在于，所述B细胞亚群包括FoB和MZB。