[发明专利]一种新型大鼠高血压模型的建立方法及其应用在审

专利信息
申请号: 201811292796.7 申请日: 2018-11-01
公开(公告)号: CN109662974A 公开(公告)日: 2019-04-23
发明(设计)人: 欧和生;罗雪兰 申请(专利权)人: 广西国际壮医医院
主分类号: A61K31/713 分类号: A61K31/713;A61K49/00
代理公司: 北京卓岚智财知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11624 代理人: 郭智
地址: 530201 广西壮*** 国省代码: 广西;45
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摘要:
搜索关键词: 大鼠高血压模型 高表达质粒 内含子 可用 应用 动物疾病模型 生理盐水稀释 血管舒张因子 大鼠尾静脉 高压状态 降压药物 血压升高 正常大鼠 大鼠 构建 血压 注射 体内 验证 筛选
【权利要求书】:

1.一种新型大鼠高血压模型的建立方法,其特征在于,应用人内含子源性27nt-miRNA高表达质粒诱导正常大鼠血压升高,形成大鼠高血压模型。

2.权利要求1的一种新型大鼠高血压模型的建立方法,其特征在于,包括的步骤如下:

(1)人内含子源性27nt-miRNA高表达质粒的构建

1)设计人内含子源性27nt-miRNA核苷酸序列

2)根据上述核苷酸序列,用DNA合成技术得到第一链DNA,接着通过DNA连接反应合成双链DNA,通过PCR扩增目的基因片段,所述PCR的反应体系如下:

上述PCR的反应程序为:95℃5min(1Cycle),(98℃10s,55℃10s,72℃90s)30Cycle,72℃8min,4℃24h;

3)线性连接与序列测定;

(2)质粒的提取与注射

提取质粒,将质粒与转染试剂混合,稀释,经大鼠尾静脉注射。

(3)血压检测

注射质粒后,应用尾动脉无创血压测定仪定期对大鼠进行血压测定,连续12周。

3.权利要求1或2所述的方法在制备降压药物筛选的应用。

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