[发明专利]蛋白质UGT142及其编码基因与应用

说明书

本发明公开了蛋白质UGT142及其编码基因与应用。蛋白质UGT142为氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白质。实验证明，蛋白质UGT142具有糖基转移酶的活性，可高效转化落叶松树脂醇生成落叶松树脂醇‑4‑O‑β‑D‑葡萄糖苷和/或落叶松树脂醇‑4’‑O‑β‑D‑葡萄糖苷和/或直铁线莲宁B。本发明具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及蛋白质UGT142及其编码基因与应用。

背景技术

菘蓝(Isatisindigotica Fort.)为十字花科菘蓝属两年生草本植物。菘蓝根为板蓝根、叶为大青叶来源之一，均为常用中药，具有清热解毒、凉血利咽之功效，临床上常用于流行性感冒、流行性腮炎、流行性乙型脑炎、急慢性肝炎、带状疱疹等疾病的治疗。木脂素及其糖苷类化合物(主要为落叶松树脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷和直铁线莲宁B)是菘蓝抗病毒重要活性物质基础之一，其合成途径上大部分关键酶基因已被鉴定，但催化关键糖基化修饰的糖基转移酶的编码基因仍然没有被鉴定。

糖基转移酶(glycosyltransferases)是将糖基从活化的核苷酸—糖供体的单糖转移到糖基受体形成糖苷键，在植物糖苷类成分的生物合成及生长过程中起着关键作用。由于落叶松树脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷和直铁线莲宁B在菘蓝原植物中含量较低，这很大程度限制其在临床上的应用。由此可见，菘蓝糖基转移酶编码基因的克隆为解析木脂素生物合成途径进而利用代谢工程调节菘蓝中木脂素糖苷的含量或直接通过合成生物学策略合成这类化合物提供重要基础。

发明内容

本发明的目的是提供一种糖基转移酶，糖基转移酶可以将落叶松树脂醇转化成落叶松树脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷和/或落叶松树脂醇-4’-O-β-D-葡萄糖苷和/或直铁线莲宁B。

本发明提供的糖基转移酶，名称为蛋白质UGT142，来源于菘蓝(IsatisindigoticaFort.)。所述蛋白质UGT142可为如下a1)或a2)或a3)：

a1)氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白质；

a2)在序列表中序列2所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；

a3)将a1)或a2)所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有糖基转移酶活性的蛋白质。

其中，序列表中序列2由486个氨基酸残基组成。

为了使a1)中的蛋白质便于纯化，可在序列表中序列2所示的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。

表1.标签的序列