[发明专利]一种与鼻咽癌辅助诊断相关的血浆miRNA标志物及其应用

说明书

本发明公开一种与鼻咽癌癌辅助诊断相关的血浆miRNA标志物及其应用，该标志物为let‑7b‑5p,miR‑140‑3p,miR‑144‑3p,miR‑17‑5p,miR‑20a‑5p,miR‑20b‑5p和miR‑205‑5p中的一种或多种。血浆miRNA作为新型的生物标志物，具有稳定性好、微创易获取，灵敏性和特异性高的特点。这类分子标志物的开发利用将为包括肿瘤在内的各种疾病的诊断以及进一步治疗提供新的方向。本研究将更有针对性的得出具有临床诊断潜能的鼻咽癌血浆miRNA标记物。研究证实了这组miRNA作为诊断鼻咽癌的无创标记物的可靠性以及可重复性。

技术领域

本发明属于基因工程及肿瘤学领域，涉及一种与鼻咽癌癌辅助诊断相关的血浆miRNA标志物及其应用。

背景技术

鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)是发生于鼻咽粘膜上皮的恶性肿瘤。虽然相比于其他种类的恶性肿瘤鼻咽癌的全球发病率并不高，但其发病率具有明显的种族和地域差异。根据世界卫生组织报道，全球有80％的鼻咽癌患者在中国，尤其在中国南部地区。目前，放射治疗是鼻咽癌的首选治疗方法，对早期患者有极高的治愈率，显著提升了整体生存率。但是很多患者疾病早期时并无症状，并在就诊时已处于中晚期，对单纯放疗的疗效较差，不利于疾病的控制。目前针对鼻咽癌的分子和临床特征的研究不断深入，鼻咽镜检查、病理检查、影像学检查都成为了临床筛查的重要手段。近年来研究发现，EB病毒感染与鼻咽癌的发生、发展密切相关，EB病毒抗体或病毒DNA的检测可以帮助早期发现高危人群。但是，这些方法或者过于依赖检测者经验，或者具有侵入性而不适合常规筛查，或者价格太高无法推广，或者检测灵敏度和特异性还有待加强。因此，迫切需要开发新的可靠的非侵入性早期诊断标记物，促进早期干预和治疗，延长病人的生存期。

微小RNA(Micro ribonucleic acids，miRNAs)的发现是最近这些年来重大发现之一。成熟的miRNA是一类进化保守，长度在18-25个核苷酸的小非编码RNA分子。据研究，miRNA可在转录后水平调控机体1/3以上的基因，从而参与机体的众多生理病理过程。miRNA的表达具有时间特异性以及组织特异性。同时，一些miRNA能够参与特定的生理病理以及特异的疾病过程。因此，某些特异的miRNA可以作为某些生理病理以及某些疾病例如肿瘤等疾病的标志物。2008年，Mitchell在外周血中检测到游离的miRNA，发现其能够稳定存在于外周血，并且能够作为诊断肿瘤的无创标志物。这一研究发现拉开了全球众多研究者开始探索循环miRNA作为无创标志物的大幕。现有研究证实了循环miRNA在包括肺癌、胃癌、乳腺癌、结直肠癌中的潜在诊断价值。目前对于循环miRNA在鼻咽癌中的诊断价值研究并不充分，并且由于研究方法及纳入人群的差异，各研究结果并不完全一致。因此，本研究利用Exiqon miRNA qPCR panel芯片以及基于qRT-PCR的相对定量法，通过对大样本的鼻咽癌血浆的研究，旨在寻找对鼻咽癌具有潜在诊断价值的血浆miRNA。并对这些miRNA在鼻咽癌组织和不同临床特征患者血浆中的表达水平进行验证和比较，以进一步明确其与鼻咽癌的关系及诊断价值。若根据这类miRNA设计针对于鼻咽癌的诊断试剂盒，将会推动我国鼻咽癌的诊治水平，也为将来对鼻咽癌的进一步研究提供思路。

发明内容

本发明的目的在于提供一种与鼻咽癌辅助诊断相关的血浆miRNA标志物。

本发明的另一目的在于提供上述血浆miRNA标志物及其引物在制备鼻咽癌辅助诊断试剂盒以及在制备治疗鼻咽癌的药物中的应用。

本发明的又一目的在于提供用于鼻咽癌辅助诊断和治疗的试剂盒及药物。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：