[发明专利]包含高浓度伊枯草菌素脂肽的组合物

说明书

本发明涉及具有高浓度伊枯草菌素脂肽的组合物。特别地，根据本发明的组合物具有浓度为20至150g/l的伊枯草菌素脂肽；由于存在表面活性剂，它们稳定且均匀。

本发明涉及具有高浓度伊枯草菌素脂肽(lipopeptides ituriniques)的组合物。特别地，根据本发明的组合物具有浓度为5至200g/L的伊枯草菌素脂肽，并且由于表面活性剂和/或助水溶性分子(molécules hydrotropes)的存在而稳定且均匀。

伊枯草菌素脂肽是由不同的芽孢杆菌属(Bacillus sp.)菌株并且更特别地是由以下的菌株产生的分子：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、热噬淀粉芽孢杆菌(Bacillus thermoamylovorans)、热阴沟芽孢杆菌(Bacillus thermocloacae)、坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)、摩加夫芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)、贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velenzensis)、死谷芽孢杆菌(Bacillus valissmortis)。非穷举性实例包括枯草芽孢杆菌菌株ATCC6633、W23、ATCC19659、DSM23117、QST713或AQ713、FMBJ、3-10、RB14、BH072及其衍生物，解淀粉芽孢杆菌菌株FZB42、KB3、SYBC H47、GA1及其衍生物。

该分子家族包含伊枯草菌素(iturine)A、A_L和C，摩加夫素(mojavensine)，抗霉枯草菌素(mycosubtilline)以及杆菌霉素(bacillomycine)A、B、C、C、D、F、L和Lc。这些组分主要因其抗真菌特性而被知晓，但它们也具有抗细菌特性。这些特性来自其两亲性性质，这使得它们与不同的膜组分相互作用。

可通过上述不同菌株在发酵液中的溶液中产生伊枯草菌素分子，然后可根据技术人员已知的方法对其进行回收以从培养物上清液提取、浓缩和纯化它们。尽管如此，它们在溶液中的行为取决于它们的浓度。事实上，已知高于临界胶束浓度(10至20mg/L)时，伊枯草菌素化合物会像其他脂肽分子一样形成或多或少的复杂胶束。另外，这些胶束的大小将随着其浓度提高演变为形成越来越复杂的结构，从浓度低于500mg/L的10nm的平均尺寸(Jauregi et al.，2013)，到高于1g/L的具有150nm的平均直径的泡状结构(Grau et al.，2001)，以及然后到浓度为10g/L时的层状双层超结构(Hamley et al.，2013)。正如这些对抗霉枯草菌素(Hamley et al.，2013)或伊枯草菌素A(Grau et al.，2001)的研究所公开的，这些超结构在例如表面活性素家族的其他脂肽分子中未发现。另外，伊枯草菌素化合物浓度的提高往往会提高其与培养基中包含的蛋白质的相互作用，并因此提高结构的大小，导致其不溶性(Jauregi et al.，2013)。

因此，伊枯草菌素化合物的这些物理化学特性引起溶解性问题，导致不稳定的组合物，该组合物在组合物中伊枯草菌素脂肽的浓度提高时倾向于沉淀或凝胶化。

接近本发明的现有技术。

现有技术涉及很少的具有浓度高于5g/L的伊枯草菌素脂肽的组合物，以及甚至更少的具有浓度高于20g/L的伊枯草菌素脂肽的组合物，这主要是因为技术人员已知伊枯草菌素脂肽倾向于形成高浓度胶束，使得该组合物不稳定，因为伊枯草菌素胶束妨碍了其良好溶解性。

然而，在现有技术中，已知专利JP2003128512(SHOWA DENKO)包含含有表面活性剂的化妆品组合物，向其添加伊枯草菌素和表面活性素用于其抗微生物特性，但是未提及这些组合物中伊枯草菌素的稳定性和均匀性，因为它们不是多种组合物的主要化合物。