[发明专利]一种鸡蛋清中蛋白质的提取方法

权利要求书

1.一种鸡蛋清中蛋白质的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）提取溶菌酶：取鸡蛋蛋清3000mL，加入蒸馏水，调节pH，加入树脂，搅拌、静置、离心，得到第一沉淀物和第一上清液，将第一沉淀物使用蒸馏水和缓冲液冲洗、洗脱液洗脱、离心，得到溶菌酶；

（2）提取卵黏蛋白：取步骤（1）所述第一上清液，加入氯化钙溶液,调节pH，离心，得到第二沉淀物和第二上清液，取所述第二沉淀物，加入蒸馏水，匀质,调节pH，离心，得到卵黏蛋白；

（3）提取卵转铁蛋白：取步骤（2）所述第二上清液，加入硫酸铵和柠檬酸，第一次调节pH，静置、离心，得到第三沉淀物和第三上清液，取所述第三沉淀物，加至十二烷基硫酸钠溶液中，离心得到第四沉淀物和第四上清液，将所述第四沉淀物倒入蒸馏水中，第二次调节pH、静置、第三次调节pH，离心，得到卵转铁蛋白，所述十二烷基硫酸钠溶液的物质的量为1-30mmol，体积为800-1200mL；

（4）提取卵类黏蛋白：取步骤（3）所述第三上清液和第四上清液，加入硫酸铵，静置、离心，得到第五上清液，加热所述第五上清液，离心，取上清液即第六上清液，加入无水乙醇、离心，得到第五沉淀物和卵类黏蛋白, 所述加热温度为50-70℃；

（5）提取卵白蛋白：取步骤（4）所述第五沉淀物，加入蒸馏水，调节pH，离心，得到卵白蛋白和第七上清液；

（6）提取卵抑制剂：取步骤（5）所述第七上清液，浓缩脱盐，调节pH，加入硫酸铵溶液，搅拌、离心，得到上清液为卵类黏蛋白，得到沉淀物为卵抑制剂；

步骤（1）所述调节pH值为9.0-9.5；

步骤（2）所述调节pH值为6.0；

步骤（3）所述第一次调节pH值为4.5，所述第二次调节pH值为8.0-10.0，所述第三次调节pH值为4.0-6.0；

步骤（5）所述调节pH值为7.0；

步骤（6）所述调节pH值为4.0。

2.根据权利要求1所述的鸡蛋清中蛋白质的提取方法，其特征在于，步骤（1）所述蛋清、蒸馏水和树脂比例为50mL：50mL：5-20g。

3.根据权利要求1所述的鸡蛋清中蛋白质的提取方法，其特征在于，

步骤（1）所述树脂为FPC3500型树脂；

所述搅拌转速为3500r/min，搅拌时间为10-15min。

4.根据权利要求1所述的鸡蛋清中蛋白质的提取方法，其特征在于，所述缓冲液是pH为9.3的甘氨酸氢氧化钠溶液，所述洗脱液是甘氨酸氢氧化钠和氯化钠的混合液，

所述甘氨酸氢氧化钠溶液为0.05-0.2mol，所述氯化钠溶液为0.1-1.0mol。

5.根据权利要求1所述的鸡蛋清中蛋白质的提取方法，其特征在于，步骤（2）所述氯化钙溶液的浓度为0.2-0.5mol/L；

氯化钙溶液、第一上清液的体积比为1：1。

6.根据权利要求1所述的鸡蛋清中蛋白质的提取方法，其特征在于，步骤（3）所述硫酸铵的质量为137-275g，柠檬酸的质量为82.5-137.5g。

7.根据权利要求1所述的鸡蛋清中蛋白质的提取方法，其特征在于，步骤（4）所述硫酸铵质量为93-155g，无水乙醇体积为1500-4500mL；所述加热温度为55℃，加热时间为15-30min。

8.根据权利要求1所述的鸡蛋清中蛋白质的提取方法，其特征在于，步骤（6）所述硫酸铵溶液为饱和溶液。

9.根据权利要求1所述的鸡蛋清中蛋白质的提取方法，其特征在于，所述静置的温度为4℃，静置时间为12小时。