[发明专利]一种利用气升式环流反应器发酵生产阿维菌素的方法在审
申请号: | 201910084779.2 | 申请日: | 2019-01-29 |
公开(公告)号: | CN109517865A | 公开(公告)日: | 2019-03-26 |
发明(设计)人: | 郑智新;高鹤永;李军华;张强;刘文彬 | 申请(专利权)人: | 内蒙古新威远生物化工有限公司 |
主分类号: | C12P19/62 | 分类号: | C12P19/62;C12N1/20;C12R1/465 |
代理公司: | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人: | 宋秀兰 |
地址: | 014300 内蒙古自治区鄂尔多斯市*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 气升式环流反应器 阿维菌素 阿维链霉菌 补料培养基 对数生长期 孢子菌悬液 发酵培养 发酵 接种 微生物发酵技术 分批补料发酵 发酵培养基 斜面培养基 种子培养基 孢子悬浮液 发酵容器 分批补料 分批添加 发酵液 孢子 染菌 效价 移种 制备 生产 优化 | ||
1.一种利用气升式环流反应器分批补料发酵生产阿维菌素的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1,将阿维链霉菌接种至斜面培养基培养,取孢子斜面,制备成孢子悬浮液;
步骤2,将步骤1中得到的阿维链霉菌孢子菌悬液接种到种子培养基,培养至对数生长期;
步骤3,将步骤2中培养至对数生长期的阿维链霉菌孢子菌悬液移种至发酵培养基中进行发酵培养;
所述步骤3中发酵培养的反应器为气升式环流反应器,发酵方式为分批补料发酵。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述分批补料的方式为:发酵进行到120-170h、190-220h和240-290h时,分别加入补料培养基。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述分批补料的方式为:发酵进行到120-170h,总糖低于50g/L,还原糖低于15g/L时;发酵进行到190-220h,总糖低于55g/L,还原糖低于20g/L时;发酵进行到240-290h,总糖低于60g/L,还原糖低于20g/L时;分别加入补料培养基。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述补料培养基包含玉米淀粉、消泡剂、碳酸钙和淀粉酶。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述补料培养基包含100-500g/L玉米淀粉、0.2-1g/L消泡剂、0.5-5g/L碳酸钙和0.1-0.5g/L淀粉酶。
6.根据权利要求4-5任一项所述的方法,其特征在于,所述淀粉酶为α-淀粉酶。
7.根据权利要求4-5任一项所述的方法,其特征在于,加入补料培养基后,调节发酵培养基的pH在6.0-8.0范围内。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述斜面培养基包含葡萄糖、琼脂粉、牛肉膏和磷酸二氢钾;所述种子培养基包含玉米淀粉、黄豆饼粉、酵母粉、花生粉、消泡剂;所述发酵培养基包含玉米淀粉、黄豆饼粉、酵母粉、硫酸铵、碳酸钙和消泡剂。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述斜面培养基包含5-50g/L葡萄糖、5-50g/L琼脂粉、5-20g/L牛肉膏和0.1-2g/L磷酸二氢钾;所述种子培养基包含10-50g/L玉米淀粉、5-50g/L黄豆饼粉、5-20g/L酵母粉、5-20g/L花生粉、0.5-5g/L消泡剂;所述发酵培养基包含50-200g/L玉米淀粉、5-50g/L黄豆饼粉、5-30g/L酵母粉、0.01-1g/L硫酸铵、0.5-5g/L碳酸钙和1-5g/L消泡剂。
10.根据权利要求8或9所述的方法,其特征在于,所述斜面培养基、种子培养基和发酵培养基的pH均为6.0-8.0。
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