[发明专利]一种谷氨酸棒状杆菌重组菌、制备方法和应用在审
申请号: | 201910107941.8 | 申请日: | 2019-02-02 |
公开(公告)号: | CN109694841A | 公开(公告)日: | 2019-04-30 |
发明(设计)人: | 刘秀霞;王新月;彭枫;董贵彬;刘春立;杨艳坤;白仲虎 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/90;C12N15/13;C12N15/16;C07K16/00;C07K14/58;C12R1/15 |
代理公司: | 无锡盛阳专利商标事务所(普通合伙) 32227 | 代理人: | 顾吉云;郭金玉 |
地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 谷氨酸棒状杆菌 重组菌 转录 外源蛋白表达量 制备方法和应用 外源蛋白表达 宿主 翻译 外源蛋白 基因 传统的 高表达 宿主菌 改造 应用 | ||
1.一种谷氨酸棒状杆菌重组菌,其特征在于:所述谷氨酸棒状杆菌重组菌的NCgl1689基因不能正确地转录或翻译。
2.根据权利要求1所述的一种谷氨酸棒状杆菌重组菌,其特征在于:所述谷氨酸棒状杆菌重组菌是由谷氨酸棒状杆菌ATCC13032将NCgl1689基因全部缺失得到,NCgl1689于基因组中所在位置为1858763-1860730,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
3.根据权利要求1所述的一种谷氨酸棒状杆菌重组菌,其特征在于:所述谷氨酸棒状杆菌重组菌是由谷氨酸棒状杆菌ATCC13032将NCgl1689基因部分缺失得到,NCgl1689于基因组中所在位置为1858763-1860730。
4.根据权利要求1所述的一种谷氨酸棒状杆菌重组菌,其特征在于:NCgl1689基因中部分缺失的为AAA结构域,AAA结构域于基因组中所在位置为1859262-1859930。
5.根据权利要求4所述的一种谷氨酸棒状杆菌重组菌,其特征在于:所述谷氨酸棒状杆菌重组菌于 2018年12月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心,保藏号为CGMCC 16958。
6.如权利要求1~5中任一所述的谷氨酸棒状杆菌重组菌的制备方法,其特征在于:采用pK18mobsacB同源重组技术敲除谷氨酸棒状杆菌ATCC13032的NCgl1689基因中的AAA结构域,使得获得的谷氨酸棒状杆菌重组菌的NCgl1689基因不能正确地转录或翻译。
7.如权利要求5所述的谷氨酸棒状杆菌重组菌在制备纳米抗体VHH的应用。
8.一种纳米抗体VHH的表达体系,其包括如权利要求5所述的谷氨酸棒状杆菌重组菌,所述谷氨酸棒状杆菌重组菌中转化有分泌组成型pXMJ19-VHH载体,所述分泌组成型pXMJ19-VHH载体的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
9.如权利要求5所述的谷氨酸棒状杆菌重组菌在制备氨基末端-脑钠肽前体NT-proBNP中的应用。
10.一种氨基末端-脑钠肽前体NT-proBNP的表达体系,其包括如权利要求5所述的谷氨酸棒状杆菌重组菌,所述谷氨酸棒状杆菌重组菌中转化有组成型pXMJ19-NT-proBNP载体,所述组成型pXMJ19-NT-proBNP载体的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
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