[发明专利]一种用于CTC高通量单细胞表型分析的微流控装置

权利要求书

1.一种用于CTCs快速分选和连续在线单细胞分析的集成的微流控芯片装置，其特征在于，所述装置依照螺旋芯片、第一侧向流芯片、气泵管、第二侧向流芯片顺序连接；其中，所述气泵管为培养管，用于收集CTCs加入探针孵育；

所述气泵管为具有两个通孔的培养管，其中一个通孔用于连接气泵使气泵中的气体进入培养管，另一个通孔与第二侧向流芯片连通使管中的样本进入第二侧向流芯片；

所述螺旋芯片为单螺旋芯片，具有若干螺旋的圆形通道、位于圆形螺旋通道中心的入口及通道末端的出口；所述入口为两个，为第一入口和第二入口，分别用于加入样品或缓冲液；所述出口为两个，分别为第三出口及废液出口；

所述第一侧向流芯片为微柱阵列结构的侧向流芯片，具有两个入口及两个出口，分别为第四入口及第五入口、第六出口及第七出口；所述第四入口及第三出口直接连通；

所述第二侧向流芯片为微柱阵列结构的侧向流芯片，具有两个入口及两个出口，分别为第八入口及第九入口、第十出口及第十一出口；

所述第五入口及所述第九入口用于加入缓冲液；

样品加入螺旋芯片，分选后的 CTCs样品液经第三出口与第四入口之间的管路进入第一侧向流芯片，待第七出口样品流出收集至气泵管中，加入探针孵育一段时间后再经第八入口进入第二侧向流芯片，标记细胞与未标记的探针在第二侧向流芯片中被进一步分开，收集第十出口的样品，在第二侧向流芯片的检测位置对依次通过的单个细胞进行信号采集。

2.如权利要求1所述的微流控芯片装置，其特征在于，所述螺旋的圆形通道的完整螺旋数为2~4。

3.如权利要求1所述的微流控芯片装置，其特征在于，所述微柱阵列中微柱为圆柱形结构，水平截面圆形的直径为25~35μm；所述微柱阵列中微柱之间呈固定间距排列，各微柱在竖直方向的间距为25~35μm，水平方向间距为10~20μm；所述微柱阵列中，水平方向的每一排微柱自入口一侧向出口一侧具有一定角度的倾斜，靠近出口端微柱的最低点高于靠近入口端微柱最低点1.2~1.7μm。

4.如权利要求1所述的微流控芯片装置，其特征在于，所述第七出口与气泵管通过管路连通。

5.如权利要求1所述的微流控芯片装置，其特征在于，所述气泵管中具有EpCAM和N-cad探针。

6.如权利要求1所述的微流控芯片装置，其特征在于，所述第二侧向流芯片微柱阵列结构与第一侧向流芯片微柱阵列结构相同。

7.如权利要求1所述的微流控芯片装置，其特征在于，所述第八入口与气泵管连通。

8.如权利要求1所述的微流控芯片装置，其特征在于，还具有检测装置，该检测装置为激光诱导的荧光装置。

9.一种利用权利要求1--8任一项所述的微流控芯片装置对CTCs进行快速分选和连续在线单细胞分析的方法，其特征在于，所述方法如下：将样品和缓冲液分别加入螺旋芯片的第一入口、第二入口中，分离后的CTCs样品液经第三出口直接进入第四入口进入第一侧向流芯片，缓冲液通入第五入口，待第七出口液体流出，将第七出口收集到的CTCs导入至气泵管中，加入探针与 CTCs孵育一段时间后，将孵育后的样品经第八入口进入第二侧向流芯片中，缓冲液通入第九入口，在第二侧向流芯片的检测点采集单细胞信号。

10.如权利要求9所述的对CTCs进行快速分选和连续在线单细胞分析的方法，其特征在于，所述缓冲液为PBS缓冲液。

11.如权利要求9所述的对CTCs进行快速分选和连续在线单细胞分析的方法，其特征在于，所述样品以90~110 uL/min的速度通入螺旋芯片的第一入口。

12.如权利要求9所述的对CTCs进行快速分选和连续在线单细胞分析的方法，其特征在于，第七出口的液体以25~35uL/min通过气泵通入第八入口。