[发明专利]从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法

权利要求书

1.一种从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）超滤、脱色：将罗汉果甜苷提取废液煮沸，保温，灭菌，冷却至常温后，超滤，加水赶洗超滤膜上的滤渣至透过液无色透明且糖度为0，透过液上阴离子交换树脂柱，收集流出液，水洗至糖度为0，收集水洗液，减压浓缩，得脱色浓缩液；用于超滤的超滤膜为陶瓷膜或高分子材料有机超滤膜；所述陶瓷膜的孔径为0.2～10.0μm；所述高分子材料有机超滤膜的截留分子量为1～10万道尔顿；所述阴离子交换树脂的型号为D-280型、LSA-700型、D-285型、D-941型或D-296型中的一种或几种；

（2）凝胶柱层析：将步骤（1）所得脱色浓缩液上凝胶树脂柱，再以水为流动相进行等度洗脱，分段收集目标洗脱液，减压浓缩，分别得罗汉果多糖粗品浓缩液和D-甘露醇粗品浓缩液；所述凝胶树脂为Sephadex G-100型、Sephadex G-150型或Sephadex G-200型葡聚糖凝胶树脂中一种或几种；所述等度洗脱的流速为5～10BV/h；

（3）醇沉、结晶：在步骤（2）所得罗汉果多糖粗品浓缩液中，加入醇溶液，搅拌均匀后，静置，离心过滤，将沉淀物冷冻干燥，得罗汉果多糖产品；将过滤的滤液减压浓缩，与步骤（2）所得D-甘露醇粗品浓缩液混合，静置冷冻结晶，过滤，醇洗至纯白色，真空干燥，得D-甘露醇产品。

2.根据权利要求1所述从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述罗汉果甜苷提取废液中多糖的质量含量为0.30～0.70%，D-甘露醇的质量含量为0.05～0.35%；所述煮沸的温度为90～100℃；所述保温的时间为30～120min；所述灭菌的温度为100～140℃，压力为0.1～0.8MPa，时间为5～60s。

3.根据权利要求1或2所述从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于：步骤（1）中，上柱的流速为0.2～2.0BV/h；所述阴离子交换树脂柱的装柱径高比为1:2～8；透过液中的固含量与阴离子交换树脂的质量体积比为1:5～20；所述水洗的流速为0.2～2.0BV/h；所述减压浓缩的温度为50～80℃，真空度为-0.10～-0.07MPa，浓缩至固含量为20～60%。

4.根据权利要求1或2所述从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于：步骤（1）中，在所述阴离子交换树脂使用前，先用1.5～2.5BV，体积分数85～99%的乙醇溶液浸泡20～30h，再用体积分数85～99%的乙醇溶液洗至流出液无色、无异味，水洗至无醇味，再用3～5BV质量浓度4～6%的氢氧化钠溶液碱洗，再水洗至中性，然后用3～5BV质量浓度4～6%的盐酸溶液酸洗，再水洗至中性，最后再用3～5BV质量浓度4～6%的氢氧化钠溶液碱洗，再水洗至中性，即成。

5.根据权利要求1或2所述从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于：步骤（2）中，上柱的流速为0.2～2.0BV/h；所述凝胶树脂柱的装柱径高比为1:10～50；所述脱色浓缩液中的固含量与凝胶树脂的质量体积比为1:8～50；所述减压浓缩的温度为20～80℃，真空度为-0.10～-0.07MPa，浓缩至固含量为40～60%。

6.根据权利要求1或2所述从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于：步骤（2）中，在所述凝胶树脂使用前，先用沸水溶胀2～4h后，湿法均匀地填充到树脂柱中，排除气泡，用洗脱剂洗脱，即成；所述洗脱剂的用量为6～10BV。

7.根据权利要求1或2所述从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于：步骤（3）中，提取罗汉果多糖产品时，所述罗汉果多糖粗品浓缩液与醇溶液的质量体积比为1:2～6；所述醇溶液的体积分数为60～95%；所述醇溶液为甲醇溶液、乙醇溶液或丙醇溶液中的一种或几种；所述静置的时间为2～4h；所述冷冻干燥的温度为-40～8℃，真空度为-0.10～-0.08MPa，时间为24～48h。

8.根据权利要求1或2所述从罗汉果甜苷提取废液中提取多糖和D-甘露醇的方法，其特征在于：步骤（3）中，提取D-甘露醇产品时，所述减压浓缩的温度为20～80℃，真空度为-0.10～-0.07MPa，浓缩至固含量为40～60%；所述静置冷冻结晶的温度为5～15℃，时间为12～48h；所述醇洗的醇溶液的体积分数为80～100%；所述醇溶液为甲醇溶液、乙醇溶液或丙醇溶液中的一种或几种；所述真空干燥的温度为50～80℃，真空度为-0.10～-0.07MPa，时间为4～12h。