[发明专利]一种用于分离肠癌循环肿瘤细胞的微流控芯片及其应用在审
申请号: | 201910354897.0 | 申请日: | 2019-04-30 |
公开(公告)号: | CN109943468A | 公开(公告)日: | 2019-06-28 |
发明(设计)人: | 吴巍;韩书文 | 申请(专利权)人: | 湖州市中心医院 |
主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00;C12M1/12;C12Q1/6844 |
代理公司: | 深圳市深联知识产权代理事务所(普通合伙) 44357 | 代理人: | 杨静 |
地址: | 浙江省湖州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 微流控芯片 循环肿瘤细胞 肠癌 分选 双螺旋通道结构 抗原抗体反应 双螺旋结构 表皮细胞 分选通道 高灵敏度 流出通道 路径控制 细胞进入 肿瘤细胞 高效率 惯性力 微流控 间质 简易 芯片 细胞 应用 | ||
1.一种用于分离肠癌循环肿瘤细胞的微流控芯片,其特征在于,该芯片包括六道双螺旋结构相连的微流控分选通道组成,包括一个细胞进入通道和三个细胞流出通道。
2.根据权利要求1所述用于分离肠癌循环肿瘤细胞的微流控芯片,其特征在于,所述芯片的长、宽均为45000μm,厚度为4000μm。
3.根据权利要求1所述用于分离肠癌循环肿瘤细胞的微流控芯片,其特征在于,所述分选通道的半径为9350μm,内径为300μm。
4.根据权利要求1所述用于分离肠癌循环肿瘤细胞的微流控芯片,其特征在于,细胞流入口及流出口内径均为1000μm,每个通道宽300μm,高40μm。
5.根据权利要求1所述用于分离肠癌循环肿瘤细胞的微流控芯片,其特征在于,相邻两个螺旋通道之间的距离为450μm。通道全长为334mm。
6.根据权利要求1所述用于分离肠癌循环肿瘤细胞的微流控芯片,其特征在于,三个流出通道的内径分别为56μm、76μm、155μm。
7.一种如权利要求1至6所述用于分离肠癌循环肿瘤细胞的微流控芯片的应用,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将待测血样采用红细胞裂解液裂解处理后,加入PBS缓冲液,稀释为进样样本;
(2)通过配套注射泵或压力泵装置,将步骤(1)中进样样本向芯片中进行匀速推注;
(3)将分选之后的CTC细胞经细胞滤膜拦截,其余细胞及清液弃置;
(4)将CTC分离完毕之后的内通道出口滤膜连同部分芯片一起切下,置于离心管中进行离心;
(5)将上述步骤(4)处理后的CTC细胞进行环介导等温扩增,设定荧光定量PCR仪每分钟检测一次荧光,记录反映曲线,以评估循环肿瘤细胞的分选效果。
8.根据权利要求7所述用于分离肠癌循环肿瘤细胞的微流控芯片的应用,其特征在于,上述步骤(1)中待测血样和红细胞裂解液以1∶5体积比混合。
9.根据权利要求7所述用于分离肠癌循环肿瘤细胞的微流控芯片的应用,其特征在于,上述步骤(5)中环介导等温扩增的温度为65℃。
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