[发明专利]一种从新鲜烟叶提取可溶性蛋白的方法

说明书

本发明公开了一种从新鲜烟叶提取可溶性蛋白的方法，其特征在于：包括以下步骤：称取新鲜烟叶100g，加入提取液后用胶体磨匀浆5min；静置时间后用120目滤布过滤除杂，加等体积提取液二次溶解沉淀后过滤，测总蛋白含量，滤液用硅藻土脱色除杂，调pH至3.0酸沉，3000rpm离心20min得可溶性蛋白；将粗产物经过真空冷冻干燥后,得到新鲜烟叶可溶性蛋白粉；所述提取液为0.05M磷酸缓冲液加PVP，提取液pH值为7.9‑8.0、料液比为1:10。本发明是采用新鲜烟叶从中提取可溶性蛋白，结合正交实验和响应面法逐步验证影响可溶性蛋白提取工艺的因素和参数设定范围，最终得到一套提取新鲜烟叶可溶性蛋白的最优提取工艺。

技术领域

本发明属于蛋白提取分离方法优化技术，具体地涉及一种从新鲜烟叶提取可溶性蛋白的方法。

背景技术

中国有广阔的叶蛋白资源，叶蛋白资源的开发利用是解决中国食品、饲料行业中蛋白质资源紧缺的一条重要途径。国内对叶蛋白的研究始于20世纪80年代后期，新鲜烟叶含有丰富的叶蛋白，如白肋烟中蛋白质含量更是高达20.48％。且烟叶可溶性蛋白含有宝贵的硒元素，所以开发利用烟叶可溶性蛋白资源变得尤为重要。

目前，关于新鲜烟叶可溶性蛋白提取利用的报道很少，大多以低次烟叶为原料，采用硫酸铵分段沉淀法或者专利技术提取烟叶蛋白质。本发明以新鲜烟叶作为原料，采用碱溶酸沉法提取可溶性蛋白质，通过正交实验及进一步的响应面实验确定提取的最佳工艺，研究出一套新鲜烟叶最佳提取工艺，旨在为新鲜烟叶可溶性蛋白的提取开发利用提供技术参数和理论指导。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从新鲜烟叶提取可溶性蛋白的方法，该方法利用正交实验和响应面法逐步优化新鲜烟叶中提取可溶性蛋白工艺，得到了一套最佳提取工艺。

本发明的目的是采取以下技术方案到达的：

一种从新鲜烟叶提取可溶性蛋白的方法，包括以下步骤：

称取新鲜烟叶100g，加入提取液后用胶体磨匀浆5min；静置40min后用120目滤布过滤除杂，加等体积提取液二次溶解沉淀后过滤，测总蛋白含量，滤液用硅藻土脱色除杂，调pH至3.0酸沉，3000rpm离心20min得可溶性蛋白；将粗产物经过真空冷冻干燥后,得到新鲜烟叶可溶性蛋白粉；所述提取液为0.05M磷酸缓冲液加PVP，提取液pH值为7.9-8.0、料液比为1:10。

所述提取液pH值为7.97。

所述静置时间为20-60min。

本发明是采用新鲜烟叶从中提取可溶性蛋白，结合正交实验和响应面法逐步验证影响可溶性蛋白提取工艺的因素和参数设定范围，最终得到一套提取新鲜烟叶可溶性蛋白的最优提取工艺。

附图说明

图1是料液比对新鲜烟叶可溶性蛋白提取率的影响结果。

图2是提取液和pH值对新鲜烟叶可溶性蛋白提取率的影响结果。

图3是匀浆后静置时间对新鲜烟叶可溶性蛋白提取率的影响结果。

图4是提取液和PH值对可溶性蛋白提取率的影响结果。

图5是提取液和料液比对可溶性蛋白提取率的影响结果。

图6是pH值和料液比对可溶性蛋白提取率的影响结果。

具体实施方式

本发明是通过以下实施例得出的：

一种从新鲜烟叶提取可溶性蛋白的方法，包括以下步骤：