[发明专利]一种提取低分子量鹿筋胶原蛋白的方法在审
| 申请号： | 201910446841.8 | 申请日： | 2019-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN110079575A | 公开（公告）日： | 2019-08-02 |
| 发明（设计）人： | 石运江 | 申请（专利权）人： | 大连金荣草生物科技发展有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C07K1/14 |
| 代理公司： | 北京世誉鑫诚专利代理事务所(普通合伙) 11368 | 代理人： | 孙国栋 |
| 地址： | 116000 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鹿筋胶原蛋白 鹿筋 低分子量 酶解液 碎块 混合液 清液 加热 预处理 醋酸 醋酸水溶液 取上清液 完全溶解 微波处理 胃蛋白酶 沸水浴 过滤 | ||
1.一种提取低分子量鹿筋胶原蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)预处理
(11)将新鲜的鹿筋去除脂肪、皮、筋膜后，切成0.8～1.2cm长度小块，再用生理盐水清洗除杂后称重记作M1；
(12)将步骤(11)得到的小块加生理盐水浸泡过夜，进一步去脂肪、皮和筋膜；
(13)将步骤(12)得到的小块进一步粉碎成碎块，然后用生理盐水反复清洗，进一步除去脂肪后称重记作M2；
(2)将经过步骤(13)处理的鹿筋碎块置于浓度为5.5wt％醋酸水溶液中至少12h，其中：
醋酸水溶液的用量以鹿筋碎块的质量M2计，其为7ml/g；
(3)将经过步骤(2)浸泡后的鹿筋碎块置于沸水浴中加热至完全溶解得到反应液，然后将该反应液离心，取上清液；
(4)向步骤(3)得到的上清液中加醋酸，调节pH至2.0±0.2，然后再向上清液中加入胃蛋白酶得到混合液，其中：
胃蛋白酶的用量以鹿筋小块的质量计，鹿筋小块的质量M1与胃蛋白酶的质量比为(500-1000)：1；
(5)将步骤(4)得到的混合液进行微波处理得到鹿筋酶解液，其中：
微波功率为300W；
微波酶解温度为37℃；
微波酶解时间为2.5h；
(6)将步骤(5)得到的鹿筋酶解液加热至温度不低于80.0℃，然后再通过NaOH水溶液调节鹿筋酶解液的pH至7.0～7.5，过滤，滤液冷冻干燥，粉碎后，即得到鹿筋胶原蛋白。
2.如权利要求1所述的一种提取低分子量鹿筋胶原蛋白的方法，其特征在于，步骤(2)中将经过步骤(13)处理的鹿筋碎块置于浓度为5.5wt％醋酸水溶液中14h。
3.如权利要求1所述的一种提取低分子量鹿筋胶原蛋白的方法，其特征在于，步骤(3)中在30℃，以8000r/min的速度离心10分钟。
4.如权利要求1所述的一种提取低分子量鹿筋胶原蛋白的方法，其特征在于，步骤(6)中的NaOH水溶液的浓度为20wt％。
5.如权利要求1所述的一种提取低分子量鹿筋胶原蛋白的方法，其特征在于，步骤(4)中鹿筋小块的质量M1与胃蛋白酶酶的质量比优选为500：1。
6.如权利要求1所述的一种提取低分子量鹿筋胶原蛋白的方法，其特征在于，步骤(4)中的上清液的pH优选为2。
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