[发明专利]一种提取低分子量鹿筋胶原蛋白的方法在审
申请号: | 201910446841.8 | 申请日: | 2019-05-27 |
公开(公告)号: | CN110079575A | 公开(公告)日: | 2019-08-02 |
发明(设计)人: | 石运江 | 申请(专利权)人: | 大连金荣草生物科技发展有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/14 |
代理公司: | 北京世誉鑫诚专利代理事务所(普通合伙) 11368 | 代理人: | 孙国栋 |
地址: | 116000 辽宁省*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鹿筋胶原蛋白 鹿筋 低分子量 酶解液 碎块 混合液 清液 加热 预处理 醋酸 醋酸水溶液 取上清液 完全溶解 微波处理 胃蛋白酶 沸水浴 过滤 | ||
本发明涉及一种提取低分子量鹿筋胶原蛋白的方法,包括以下步骤:(1)预处理;(2)将经鹿筋碎块置于醋酸水溶液中至少12h;(3)将鹿筋碎块置于沸水浴中加热至完全溶解得到反应液,然后将该反应液离心,取上清液;(4)向上清液中加醋酸,调节pH,然后再向上清液中加入胃蛋白酶得到混合液;(5)将混合液进行微波处理得到鹿筋酶解液;(6)将鹿筋酶解液加热至温度不低于80.0℃,然后调节鹿筋酶解液的pH至7.0~7.5,过滤,滤液冷冻干燥,粉碎后,即得到鹿筋胶原蛋白。本发明公开的一种提取低分子量鹿筋胶原蛋白的方法具有以下有益效果:1、处理时间短;2、提取的鹿筋胶原蛋白分子量小。
技术领域
本发明属于生物工程领域,具体涉及一种提取低分子量鹿筋胶原蛋白的方法。
背景技术
鹿筋是鹿科动物(例如马鹿或梅花鹿)的四肢附在肌腱或骨头部位的韧带,是一种由平行致密的胶原纤维束组成的结缔组织,含有丰富的胶原蛋白物质。据《唐本草》记载,鹿筋是营养保健价值很高的补品,可用于治疗肾虚、手足无力、风湿关节疼痛、转筋、劳损等。梅花鹿鹿筋胶原蛋白是鹿筋胶原的水解产物,具有较小的分子量,在水溶液中具有一定的溶解性,并且容易降解,易被人体吸收,在食品、药品、化妆品等领域具有广泛的应用和很高的经济价值
目前,获得具有较低分子量的鹿筋胶原蛋白的方法主要有酸法、碱法和酶法。由于单纯使用酸法和碱法获得的鹿筋胶原蛋白存在容易影响其本来的生物活性、提取率低等不足,因此采用酶法是获得低分子量鹿筋胶原蛋白较好的方法。
但是目前酶法获得的鹿筋胶原蛋白存在以下不足之处:
(1)使用酶酶解鹿筋的提取时间较长;
(2)酶解后得到的鹿筋胶原蛋白分子量较大。
发明内容
发明目的:本发明针对上述现有技术存在的问题做出改进,即本发明公开了一种提取低分子量鹿筋胶原蛋白的方法。
技术方案:一种提取低分子量鹿筋胶原蛋白的方法,包括以下步骤:
(1)预处理
(11)将新鲜的鹿筋去除脂肪、皮、筋膜后,切成0.8~1.2cm长度小块,再用生理盐水清洗除杂后称重记作M1;
(12)将步骤(11)得到的小块加生理盐水浸泡过夜,进一步去脂肪、皮和筋膜;
(13)将步骤(12)得到的小块进一步粉碎成碎块,然后用生理盐水反复清洗,进一步除去脂肪后称重记作M2;
(2)将经过步骤(13)处理的鹿筋碎块置于浓度为5.5wt%醋酸水溶液中至少12h,其中:
醋酸水溶液的用量以鹿筋碎块的质量M2计,其为7ml/g;
(3)将经过步骤(2)浸泡后的鹿筋碎块置于沸水浴中加热至完全溶解得到反应液,然后将该反应液离心,取上清液;
(4)向步骤(3)得到的上清液中加醋酸,调节pH至2.0±0.2,然后再向上清液中加入胃蛋白酶得到混合液,其中:
胃蛋白酶的用量以鹿筋小块的质量计,鹿筋小块的质量M1与胃蛋白酶的质量比为(500-1000):1;
(5)将步骤(4)得到的混合液进行微波处理得到鹿筋酶解液,其中:
微波功率为300W;
微波酶解温度为37℃;
微波酶解时间为2.5h;
(6)将步骤(5)得到的鹿筋酶解液加热至温度不低于80.0℃,然后再通过NaOH水溶液调节鹿筋酶解液的pH至7.0~7.5,过滤,滤液冷冻干燥,粉碎后,即得到鹿筋胶原蛋白。
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