[发明专利]一种酶/金属纳米颗粒杂化催化剂的制备方法及应用在审
| 申请号： | 201910521583.5 | 申请日： | 2019-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN110241104A | 公开（公告）日： | 2019-09-17 |
| 发明（设计）人： | 程桂林;蒋成君 | 申请（专利权）人： | 浙江中医药大学 |
| 主分类号： | C12N9/96 | 分类号： | C12N9/96;C12N9/20;C12P41/00 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 郑海峰 |
| 地址： | 310053 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 杂化催化剂 金属纳米颗粒 制备 脂肪酶 胺类化合物 金属离子 原位还原 空间结构 定点突变技术 动态动力学 关键氨基酸 氨基酸序 透射电镜 形貌特征 高分辨 金属酶 手性醇 消旋化 基质 能谱 氢键 嵌入 应用 | ||
1.一种酶/金属纳米颗粒杂化催化剂的制备方法，其特征在于酶催化金属离子原位还原，得到的金属纳米颗粒均匀地分布在酶上或嵌入在酶的基质中；所述方法包括如下步骤：
(1)在溶液中，按一定比例加入酶和金属离子源，在反应温度下搅拌一定的时间；所述的酶为脂肪酶CAL-B，或具备关键氨基酸序列的生物大分子；
(2)离心，移去上层清液，然后用去离子水洗涤三次，再次离心，合并上层清液；
(3)最后用去离子水洗涤后，冷冻干燥，得到酶/金属纳米颗粒杂化催化剂。
2.根据权利要求1所述的酶/金属纳米颗粒杂化催化剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的关键氨基酸序列为脂肪酶CAL-B中第111位至128位的氨基酸序列，如SEQ IDNO1所示。
3.根据权利要求1所述的酶/金属纳米颗粒杂化催化剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的金属离子源为氯化盐、醋酸盐或四氯钯酸盐。
4.根据权利要求1或3所述的酶/金属纳米颗粒杂化催化剂的制备方法，其特征在于：所述的金属离子源中的金属离子为Pd、Cu或Zn。
5.根据权利要求1所述的酶/金属纳米颗粒杂化催化剂的制备方法，其特征在于：所述的酶和金属离子源的加入摩尔比为0.5～5。
6.根据权利要求1所述的酶/金属纳米颗粒杂化催化剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的溶液为水溶液，或含有体积百分比为10～70％有机溶剂的水溶液，所述的有机溶剂为四氢呋喃(THF)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、甲醇、乙醇或乙腈中的一种或多种。
7.根据权利要求1所述的酶/金属纳米颗粒杂化催化剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的反应温度为0～70℃，且反应温度以酶活的变性温度为上限。
8.根据权利要求1所述的酶/金属纳米颗粒杂化催化剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的搅拌一定的时间为搅拌12～72小时。
9.根据权利要求1-8任一项方法制备的酶/金属纳米颗粒杂化催化剂。
10.权利要求9所述的酶/金属纳米颗粒杂化催化剂应用于手性醇或胺类化合物的消旋化反应，以及醇或胺类化合物的动态动力学拆分的用途。
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