[发明专利]一种耐温型酵母及其分离培养方法和应用

权利要求书

1.一种耐温型酵母，其特征在于，所述耐温型酵母命名为酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)YP005A菌株，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2019年2月25日，保藏编号为CGMCC No.17256，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.如权利要求1所述的耐温型酵母，其特征在于，所述耐温型酵母是从浓香型中高温大曲中分离筛选得到的；

优选地，所述浓香型中高温大曲的主发酵时间为1-5天。

3.如权利要求1或2所述的耐温型酵母的分离培养方法，其特征在于，所述分离培养方法包括如下步骤：

(1)将浓香型中高温大曲与无菌水混合后得到菌悬液；

(2)将步骤(1)得到的菌悬液稀释后于无菌改良固体培养基上进行培养，获得菌落；

(3)挑取步骤(2)中形态规则的菌落在无菌改良固体培养基上进行分离纯化，获得单个纯种菌落并筛选出所述耐温型酵母。

4.如权利要求3所述的耐温型酵母的分离培养方法，其特征在于，步骤(2)所述无菌改良固体培养基按质量百分比计包括如下组分：葡萄糖1-3％、蛋白胨1-3％、酵母膏0.5-2％、琼脂粉1-3％、大曲浸提液10-30％，其余为无菌水。

5.如权利要求3或4所述的耐温型酵母的分离培养方法，其特征在于，步骤(2)所述无菌改良固体培养基按质量百分比计包括如下组分：葡萄糖2％、蛋白胨2％、酵母膏1％、琼脂粉2％、大曲浸提液20％，其余为无菌水。

6.如权利要求3-5中任一项所述的耐温型酵母的分离培养方法，其特征在于，步骤(2)中是将步骤(1)得到的菌悬液稀释后用滚珠法涂布于无菌改良固体培养基上进行培养；

优选地，所述培养的温度为26-30℃，优选28℃；

优选地，所述培养的时间为2-4天，优选3天。

7.如权利要求3-6中任一项所述的耐温型酵母的分离培养方法，其特征在于，步骤(3)所述分离纯化的方法为：挑取步骤(2)中形态规则的菌落在无菌改良固体培养基上进行5-10次划线培养，达到分离纯化的目的。

8.如权利要求3-7中任一项所述的耐温型酵母的分离培养方法，其特征在于，步骤(3)所述筛选是采用26S rDNA序列同源性分析法进行筛选；

优选地，所述筛选得到的耐温型酵母保藏于无菌改良固体斜面培养基中备用。

9.如权利要求3-8中任一项所述的耐温型酵母的分离培养方法，其特征在于，所述分离培养方法包括如下步骤：

(1)将浓香型中高温大曲与无菌水混合后得到菌悬液；

(2)将步骤(1)得到的菌悬液稀释后用滚珠法涂布于无菌改良固体培养基上在26-30℃下进行培养2-4天，获得菌落；

(3)挑取步骤(2)中形态规则的菌落在无菌改良固体培养基上进行5-10次划线培养以分离纯化，获得单个纯种菌落并采用26S rDNA序列同源性分析法筛选出所述耐温型酵母。

10.如权利要求1或2所述的耐温型酵母在酿酒中的应用。