[发明专利]一种无动物源性绵羊精液低温保存稀释液及方法

说明书

本发明公开了一种无动物源性绵羊精液低温保存稀释液及方法，涉及畜牧养殖技术领域。所述稀释液包括以下组分：葡萄糖12‑29g，海藻糖10‑50g，柠檬酸钠8‑13g，青霉素60‑120万IU，链霉素60‑120万IU，蒸馏水1000mL。将精液与稀释液按1:4在30‑35℃的等温条件下混合后存放于小瓶中，用4‑8层纱布包裹小瓶后放置于0‑5℃冰箱中。本发明稀释液有效存活时间不低于130h；总存活时间不低于180h；生存指数不低于90；保存48h后的顶体完整率不低于75％；保存48h后的畸形率不高于13％；本发明配制稀释液所用物质全是化学试剂，不含卵黄或牛奶等动物源性物质，安全可靠，品质优异，成本低，配制稀释液方法简单。

技术领域

本发明涉及畜牧养殖技术领域，尤其涉及一种无动物源性绵羊精液低温保存稀释液及方法。

背景技术

羊的精子在体外不能长久存活，低温保存24小时后精子活力与受精能力显著下降。为延长精液保存时间，应及时将采得的精液用良好的稀释液进行稀释。稀释液的作用为精子存活提供新的养分和能量；提供缓冲剂，防止乳酸形成过程中pH值变化对精子的危害；维持精液正常的渗透压和电解平衡；抑制细菌生长；防止迅速冷却过程中，低温引起冷休克对精子的伤害；稀释精液可大大增加精液量，以便于扩大授精母羊数，这对充分发挥优秀种公羊的作用，改良羊群品质非常有利。

常用于绵羊、山羊精液稀释液的配方基础液都应无菌操作配制，一般每次制作不要超过l周的用量。羊的精液如在采精后数小时内使用，一般不用稀释或只用鲜奶稀释较为方便。鲜牛奶或羊奶应经92-95℃、8-15分加热消毒，或用9克奶粉加100毫升蒸馏水溶解后作为稀释液，或用葡萄糖3克、卵黄20毫升、柠檬酸1.4克和蒸馏水100毫升配制稀释。根据精液品质和精子密度，稀释的倍数以l-3倍为好。为抑制精子的活动，降低代谢和能量消耗，一般都采用低温(0-5℃)保存，精子的存活时间比常温条件下显著延长。但是低温对精于的冷刺激易造成不可逆转的休克现象，因此除了在稀释液中添加卵黄、奶类、甘油等保护物质外，还应注意降温的速度，保存期间应尽量恒温。

传统稀释液中含有卵黄等动物源性物质，卵黄作为精液稀释液中广泛应用的物质，具有很大的作用。而近年来研究发现，应用含有病原菌的动物源性原料会给动物生产及人类生命造成很大的威胁。目前很多国家针对动物源性原料出台了一些政策，甚至禁止使用。卵黄内可能存在病原微生物，而这种病原微生物会在精液稀释液的携带下广泛传播，这必将影响到优秀种畜禽遗传资源的广泛利用及其在国际间的交流。另外，在卵黄中并不是所有的成分都对精子有益，只有卵磷脂和低密度脂蛋白(LDL)是对精子起保护作用的有效成分。蛋黄中的高密度脂蛋白(HDL)所具有的大颗粒分子物质不利于精子冷冻后的存活，可诱导精子膜上的胆固醇等物质外流，使精子出现获能等变化。卵黄中的一些物质可以抑制精子的呼吸，降低精子的存活率。稀释液中的卵黄还会加速精子发生获能反应，进而使精子的能量过早释放，降低存活时间。另外卵黄中的成分还由于所选用的鸡的品种及饲养水平不同而有所差异，进而影响稀释液的质量。而且卵黄不能提前添加，只能在精液稀释现场二次添加，相当于二次配制稀释液，操作麻烦，费时费力，也不便于规范化和标准化，不便于商业化生产，无动物源性稀释液的成分全部是化学物质，可以提前配置，消毒处理后在0-5℃条件下能保存1年之久而不变质，在精液稀释时可以直接进行稀释，操作简单，便于商业化生产。

发明内容

有鉴于此，本发明实施例提供了一种无动物源性绵羊精液低温保存稀释液及方法，主要目的是解决绵羊精液低温保存时间短、避免添加动物源性物质、简化精液稀释操作步骤的问题。

为达到上述目的，本发明主要提供了如下技术方案：

一方面，本发明实施例提供了一种无动物源性绵羊精液低温保存稀释液，所述稀释液包括以下组分：

葡萄糖12-29g，海藻糖10-50g，柠檬酸钠8-13g，青霉素60-120万IU，链霉素60-120万IU，蒸馏水1000mL。