[发明专利]一种纳米探针综合体系在肿瘤标志物检测试剂盒中的应用

说明书

本发明公开一种纳米探针综合体系在肿瘤标志物检测试剂盒中的应用，所述纳米探针综合体系包括葡萄糖氧化酶标记的ELISA体系、与所述葡萄糖氧化酶标记的ELISA体系结合的二氧化硅包覆银包金纳米棒，以及银离子荧光探针。本发明将纳米探针综合体系应用于肿瘤标志物检测试剂盒中，可同时实现肿瘤标志物的比色/荧光/光声的三输出检测。此外，该检测系统具有两步放大的设计：一是通过磁珠表面装载大量的葡萄糖氧化酶分子；二是通过酶催化产生的H₂O₂将银层刻蚀形成大量的Ag⁺，因此保证了探针综合体系对目标分析物的检测灵敏度，因此在肿瘤标志物检测领域将具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及纳米材料医药应用领域，尤其涉及一种纳米探针综合体系在肿瘤标志物检测试剂盒中的应用。

背景技术

肿瘤标志物是一类反应肿瘤存在的化学物质，它们主要存在于血液、尿液或肿瘤组织中，其存在或含量改变可以指征肿瘤的性质，以帮助肿瘤的诊断、分类、预后判断以及疗效观察。因此，肿瘤标志物的检测对于癌症早期诊断至关重要。目前临床常见的检测手段有：放射免疫分析、化学发光免疫分析、酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)、液体活检、蛋白芯片技术等等。其中，由于ELISA具有样品需求量少、分析成本低、操作简单、灵敏度高和选择性好等优点，因此成为临床肿瘤标志物检测中使用最广泛的一种手段。

随着纳米技术的飞速发展，许多纳米材料，如金纳米材料、磁性纳米粒子、量子点、碳纳米管等等，由于其具有巨大的比表面积、独特的光学、磁学以及电学特性而被广泛开发为肿瘤标志物的检测传感器。将这些纳米材料与传统ELISA体系结合建立复合分析系统，为肿瘤标志物检测的实际应用提供了新的机会。现有研究将GNPs与传统额ELISA体系结合，通过ELISA体系中吸附的过氧化氢酶控制GNPs的生长，当存在分析物时会产生具有不同颜色的有色溶液。在该反应方案中，当目标分析物的浓度高时，GNPs非聚集的胶体悬浮液生长，溶液呈现红色；当目标分析物浓度低时，GNPs聚集生长，溶液呈现蓝色，因此可实现低浓度的肿瘤标志物的比色检测。这种新型检测系统可以与过氧化氢酶作为酶标记结合到任何现有的ELISA体系中，以改善低浓度分析物的裸眼检测。比色法(colorimetry)是通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法，通过比色法来检测肿瘤标志物的方法较为单一且应用领域有限。

因此，现有技术还有待于改进和发展。

发明内容

鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种纳米探针综合体系在肿瘤标志物检测试剂盒中的应用，旨在解决现有肿瘤标志物检测方法单一及应用领域有限的问题。

本发明的技术方案如下：

一种纳米探针综合体系在肿瘤标志物检测试剂盒中的应用，其中，所述纳米探针综合体系包括葡萄糖氧化酶标记的ELISA体系、与所述葡萄糖氧化酶标记的ELISA体系结合的二氧化硅包覆银包金纳米棒，以及银离子荧光探针。

所述纳米探针综合体系在肿瘤标志物检测试剂盒中的应用，其中，所述葡萄糖氧化酶标记的ELISA体系包括牛血清蛋白，特异性抗体Ab1，结合葡萄糖氧化酶与特异性抗体Ab2的磁珠。

所述纳米探针综合体系在肿瘤标志物检测试剂盒中的应用，其中，所述二氧化硅包覆银包金纳米棒的直径为80-100nm。

所述纳米探针综合体系在肿瘤标志物检测试剂盒中的应用，其中，所述银离子荧光探针包括罗丹明B。

所述纳米探针综合体系在肿瘤标志物检测试剂盒中的应用，其中，所述肿瘤标志物选自血清癌胚抗原、甲胎蛋白和前列腺特异抗原中的一种或多种。