[发明专利]一种检测双光子汞离子荧光探针及其制备方法与使用方法

权利要求书

1.一种检测双光子汞离子荧光探针,其特征在于：其分子式为C₁₈H₁₇NO₂S，简称TPM1，结构式为式(I)：

2.如权利要求1所述的一种检测双光子汞离子荧光探针的制备方法，其特征在于，合成步骤如下：

1)将10g 8-羟基-4-甲基-2H-苯并[g]苯并吡喃-2-酮和9.6mL三氟甲磺酸酐溶于400mL吡啶中，室温反应12小时后，旋干溶剂，加入1L二氯甲烷，用1L水洗涤，干燥得化合物8-三氟甲磺酰氧基-4-甲基-2H-苯并[g]苯并吡喃-2-酮；

2)将5g化合物8-三氟甲磺酰氧基-4-甲基-2H-苯并[g]苯并吡喃-2-酮，188mg醋酸钯，3.8g碳酸铯，782mg 2,2'-双(二苯基膦)-1,1'-联萘和7mL吗啡啉溶于500mL甲苯中，加热回流12小时，将反应液用硅藻土过滤，旋干溶剂，向混合物中加入500mL水，用500mL二氯甲烷萃取，干燥后得到4-甲基-8-吗啉代-2H-苯并[g]色烯-2-酮；

3)将1.3g 4-甲基-8-吗啉代-2H-苯并[g]色烯-2-酮和2.7g劳森试剂溶于200mL甲苯中，回流反应4小时后，旋干溶剂，向混合物中加入200mL水，用300mL二氯甲烷萃取，干燥后的固体用50mL乙醇重结晶后得到4-甲基-8-吗啉代-2H-苯并[g]色烯-2-硫酮，即：TPM1。

3.根据权利要求1所述的一种检测双光子汞离子荧光探针的使用方法；其特征在于：

1)向不同浓度汞离子的缓冲溶液中加入相同浓度的式(I)所示化合物，配置至少5种不同汞离子含量的含有式(I)所示化合物的标准溶液；

所示缓冲溶液为磷酸盐缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液、HEPES缓冲溶液或硼酸-硼酸钠缓冲溶液；

所示标准溶液的pH值为5～11；

所示标准溶液中式(I)所示化合物的浓度为1nM～1μM；

所示标准溶液中汞离子的含量为0.1nM～1mM；

2)分别测定所述标准溶液的荧光发射光谱，激发波长为485nm，以汞离子浓度为横坐标，以I₅₅₃/I₆₃₅为纵坐标，建立标准曲线；

I₅₅₃表示所述标准溶液在波长为553nm处的荧光发射峰强度值；

I₆₃₅表示所述标准溶液在波长为635nm处的荧光发射峰强度值；

3)向待测样品中加入式(I)所示化合物，控制其浓度与所述标准溶液中式(I)所示化合物的浓度相等；测定其在激发波长为485nm的激发光下的荧光发射谱，根据标准曲线计算得出待测样品的汞离子含量。