[发明专利]一种调制乳粉中维生素K1

说明书

本发明公开了一种调制乳粉中维生素K₁和维生素K₂含量的测定方法，包括以下步骤：(1)采用酶解、皂化的方式提取待测调制乳粉中的维生素K₁和维生素K₂，得到样品提取液；(2)采用柱后锌粉还原‑高效液相色谱‑荧光检测方法，对所述样品提取液中维生素K₁和维生素K₂进行检测，得到液相色谱数据；(3)根据维生素K₁和维生素K₂的液相色谱标准工作曲线，得到待测调制乳粉中维生素K₁和维生素K₂的含量。本方法定性定量准确，灵敏度高，重现性好，能满足调制乳粉中维生素K含量的检测要求。

技术领域

本发明涉及食品检测技术领域，尤其涉及一种调制乳粉中维生素K₁和维生素K₂含量的测定方法。

背景技术

维生素K是一类具有叶绿醌生物活性的萘醌基团的衍生物，参与止血、骨代谢和细胞生长、维持心血管健康等诸多功能，是人体必需的脂溶性维生素。天然存在的维生素根据其侧链形式不同可以分为维生素K₁(叶绿醌，VK1)和维生素K₂(甲萘醌类，VK2) 两种，广泛存在于自然界中，与人体代谢密切相关，也是研究及应用最多的两类化合物。维生素K₁和维生素K₂都是脂溶性维生素，对光和碱敏感，有耐热性，在生物体内具有不同强度的生物活性。维生素K₁为单一化合物，其侧链上只包含有一个异戊烯结构单元，主要来源于绿叶蔬菜(如菠菜、甘蓝、莴苣等)与大豆及其制品。维生素K₂由肠道细菌合成，另外纳豆、蛋黄、动物肝脏、发酵品中少量含有，维生素K₂是由一条C3上异戊二烯侧链和一个甲基萘醌母环组成的系列化合物，共有14种同系物。维生素K作为一种营养补充剂应用到调制乳粉中，对于维生素K缺乏症有很好的预防作用。

国内对食品中维生素K₁的检测研究较多，而对食品中同时检测定生素K₁和维生素K₂的检测方法相对较少，主要有分光光度法、液相色谱-紫外检测器法、液相色谱-荧光检测法、液相色谱-质谱法等。其中分光光度法分析步骤繁琐、且精密度不高；高效液相色谱-紫外检测法选择性和灵敏度不高，无法满足食品中微痕量组分的检测需求；高效液相色谱-质谱法虽然具有较高的灵敏度，但其仪器复杂、成本较高，而且食品基质复杂，易影响定量准确性。

发明内容

本发明提供了一种调制乳粉中维生素K₁和维生素K₂含量的测定方法，以解决维生素K₁和维生素K₂含量同时准确测量的问题。

本发明提供的一种调制乳粉中维生素K₁和维生素K₂含量的测定方法，包括以下步骤：

(1)采用酶解、皂化的方式提取待测调制乳粉中的维生素K₁和维生素K₂，得到样品提取液；

(2)采用柱后锌粉还原-高效液相色谱-荧光检测方法，对所述样品提取液中维生素 K₁和维生素K₂进行检测，得到液相色谱数据；

(3)根据维生素K₁和维生素K₂的液相色谱标准工作曲线，得到待测调制乳粉中维生素K₁和维生素K₂的含量。

可选地，步骤(1)包括：避光条件下，将待测调制乳粉经脂肪酶酶解，氢氧化钠-乙醇皂化，正己烷萃取，氮吹浓缩，甲醇复溶，有机滤膜过滤，得到样品提取液。

可选地，步骤(2)的色谱条件如下：

色谱柱：C18色谱柱；柱后锌粉还原柱；