[发明专利]一种分析有益菌菌种的方法及其应用在益生菌菌种的筛选

说明书

本发明提供一种分析有益菌菌种的方法及其应用在益生菌菌种的筛选。上述的分析有益菌菌种的方法是使用具有专一性的引子组鉴别和定量检体中的有益菌菌种，并依此作为适合个体益生菌菌种的筛选依据。

技术领域

本发明是关于一种分析有益菌菌种的方法及其应用在益生菌菌种的筛选。上述的分析有益菌菌种的方法是使用具有专一性的引子组鉴别检体中的有益菌种类并进行其含量分析，借此作为适合个体益生菌菌种的筛选依据。

背景技术

根据医学研究，人类的健康状况和存在于肠道中的微生物菌群有密切关系，甚至与许多疾病有高度的相关性，但目前仍缺乏通过对体内肠道菌的研究进而建立系统性的体外评估。

近年来益生菌市场蓬勃发展，市场上有各种益生菌产品。但是若没有通过精准地检测，是无法了解自我的肠道缺少哪些有益菌；因此在目前没有科学依据的情况下就补充益生菌产品，不仅多吃无益，也无法让服用进去的益生菌定殖而改善肠道环境。

综上所述，在现今精准医疗和预防医学的发展趋势下，与人类健康关系紧密的肠道菌群在未来势必成为精准医疗的标的，因此研究发展建立一种分析有益菌菌种的方法，特别是一种在体外精准分析有益菌的种类和其含量，并做为个体精准化筛选合适益生菌菌种的方法，实为一亟需研发的项目和课题。

发明内容

鉴于上述的发明背景，为了符合产业上的要求，本发明提供一种分析有益菌菌种的方法及其应用在益生菌菌种的筛选，借此达到益生菌精准化配对给适合个体的目的。

本发明内容一些常用用语的解释如下所述。

本发明内容所述的个体是包含人、宠物、牲畜等所有哺乳动物或其他可应用益生菌调节其生理功能的生物，或食物、土壤等物体的样本。

本发明内容所述的有益菌菌种筛选及其应用，皆属于个体保健的范围，不涉及疾病的治疗和诊断行为。

本发明内容所述的排序，其方式是由低至高进行数值的优先顺序排列，所述的末一位是指含量分析或计算数值最低的有益菌菌种；所述的排序末三位是指含量分析或计算数值是倒数第一、二和三位的有益菌菌种。

本发明的第一目的在于提供一种分析有益菌菌种的方法。该分析有益菌菌种的方法包含但不限于如下所述的步骤。

步骤一：抽取检体中所包含的细菌的全部基因。

步骤二：提供多个引子组和一个内部校正引子组；该多个引子组是分别用于鉴别该检体中单一种类有益菌的引子组；该内部校正引子组是用于侦测该检体中全部种类细菌基因的引子组，和该内部校正引子组的前置引子是SEQ ID NO1和反置引子是SEQ ID NO 2；或前置引子是SEQ ID NO 3 和反置引子是SEQ ID NO 4。

步骤三：以内部校正引子组和上述的细菌全部基因进行即时侦测聚合酶连锁反应(Real time Polymerase chain reaction，qPCR)，借此得到检体中全部种类的细菌基因产物含量，以Ct数值(cycle number value)表示且定义为I。

步骤四：以该多个引子组分别和上述的细菌的全部基因进行即时侦测聚合酶连锁反应(Real time Polymerase chain reaction，qPCR)，借此分别得到该单一种类有益菌的基因产物含量，以Ct数值(cycle number value) 表示且定义为S。

步骤五：进行一运算步骤得到该单一种类有益菌的含量R，其计算公式如下所述，其中DCt是S和I的差值，借此完成所述的有益菌菌种的分析。

计算公式：

DCt＝S-I

a＝-DCt

R＝(2^a)×10⁷