[发明专利]一种分离自高盐榨菜废水中的海杆菌ZAA002菌株及其筛选方法和应用

说明书

本发明公开了一种分离自高盐榨菜废水中的海杆菌ZAA002菌株，已于2018年8月21日保藏于中国典型培养微生物保藏中心，保藏编号为CCTCC No.2018554。该海杆菌ZAA002菌株的分离方法，包括如下步骤：1)取榨菜高盐废水，并将该高盐废水进行加水稀释；2)采用逐步稀释法将样品进行初步分离筛选后，经LB培养基活化，再多次转接到废水中，并从中选取生长培养周期短且OD600≥0.5的菌株作为初筛菌株；3)将初筛菌株接种于经过水质调节过的废水中，选取对废水COD处理效果≥50％的菌株，作为复筛菌株，并将该复筛菌株置于培养箱培养，待长出明显菌落，并经进一步划线纯化，进而获得纯菌种ZAA002菌株。该海杆菌ZAA002菌株应用于榨菜废水COD的降解，5天内COD的降解达54.5％。

技术领域

本发明涉及蔬菜加工与食品生物技术领域，具体涉及一种分离自高盐榨菜废水中的海杆菌ZAA002菌株及其筛选方法和应用。

背景技术

榨菜是我国传统的著名酱腌制品，同德国的甜酸甘蓝、欧洲酱黄瓜一起并称为世界三大名腌菜，以浙江、重庆和四川为国内最主要的产地，全国榨菜成品年产量达90万吨以上。榨菜生产过程会产生大量废水，包括腌制、淘洗、脱盐等生产工艺中排放的废水中有很高的盐浓度和有机物浓度。当前，盐渍蔬菜行业存在淡水耗量大、卤水大量排放且高盐(含盐量﹥10％)、高污染物浓度(COD浓度高达40000mg/L)、难降解、排放易导致河流、村镇饮用水源及农田土壤严重污染等问题，严重制约了我国盐渍蔬菜行业的发展及市场的推广。以浙江省为例，浙江省是全国榨菜第二大主产区，年加工榨菜约150万吨，每加工1吨榨菜成品将产生约1.5吨的污水，仅海宁31家榨菜企业每天污水排放量为1300余吨，每年浙江省产生的榨菜污水高达225万吨，据此测算浙江省每年产生的盐渍蔬菜废水约为400-500万吨。榨菜在给我国农民带来经济效益的同时，也极大地污染了环境。因为我国传统意义上的榨菜腌制是依靠食盐的高渗透压和高盐量等方法进行的，包括目前的低盐产品也是高盐坯料经脱盐而加工成的，高盐榨菜坯料的含盐量高达13％～15％以上。高盐使榨菜坯料得以较长时间的保存，但是高盐的弊端除给人类因长期食用高钠低钾容易引发高血压等疾病外，高浓度的含盐废水排放(COD含量高达40000mg/g)会使河网水体及农田受到严重污染从而导致水体黑臭、土壤板结及盐碱化环境污染严重。

如今，盐渍蔬菜加工废水的治理办法主要是传统生化法，其存在占地面积大、资金投入大、污水排放时间、排放量不规律以及耐盐菌群驯化难、COD的降解能力差、盐分含量高、运行维护困难、治污成本较高等缺点，导致企业治污积极性不高，环保部门监管困难，分布乡镇的盐渍蔬菜企业经常把未经有效处理的废水偷偷排放，对受纳水体水环境形成以及周边河田等造成严重威胁。

微生物作为污水生物处理的主体，决定着整个系统的处理效果。因此，深入探究处理过程中的微生物群落结构对污水处理工艺的运行和优化具有指导性意义。传统微生物检测主要通过镜检、纯种分离、培养计数和生理生化鉴定等方法对微生物分析，测定，培养过程复杂耗时，可培养的细菌仅占污泥中微生物总数的1％-5％，加之选择培养技术等定量方法准确性低，使得废水处理微生物研究处于“黑匣子”阶段。近年来，现代分子生物学技术引起了广泛关注，它能高效、快捷地分析微生物种群多样性、发育水平、群落结构域分布及微生物动态变化等。

授权公告号为CN101629153B的中国专利文献公开了一种利用复合菌群处理榨菜废水的方法，该方法使用以盐单胞菌、假丝酵母菌、海杆菌和芽孢杆菌为主的复合菌群，结合SBR工艺对榨菜废水进行处理，具有较好的COD去除率。但是，该方法利用到SBR工艺，SBR工艺包括：进水、曝气、沉淀、排泥、排水和闲置共六个工序，其工艺较为复杂，且对工艺参数要求比较高。另外，该复合菌群中的混合菌株之间会出现拮抗作用。

发明内容

本发明针对榨菜废水浓度COD浓度高、难降解等问题，提出了一种分离自高盐榨菜废水中的海杆菌ZAA002菌株及其筛选方法和应用，该海杆菌能高效降解榨菜废水中的COD，可广泛应用于榨菜污水处理。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：