[发明专利]一种藿香组织培养快速繁殖及育苗方法

权利要求书

1.一种藿香组织培养快速繁殖的方法，其特征在于采用藿香芽苞和叶片作为外植体，消毒，配制分化培养基，壮苗培养基，接种，培养，其技术工艺步骤如下：

步骤（1），采外植体：选定藿香的嫩枝条剪下，连芽和叶片保湿保鲜釆集，选取芽苞和嫩叶放清水冲洗，然后用饱和洗衣粉水清洗，再用流动的清水漂洗2～5分钟；

步骤（2），无菌分化：把漂洗干净的藿香芽苞或嫩叶片作为外植体，在无菌接种室工作台上用72%～75%的酒精消毒10～15秒后，用无菌水冲洗2～5次后置于0.1%～0.2%的升汞中消毒3～15分钟，再用无菌水漂洗4～6次，去掉外表杂物，

把所消毒的芽苞、叶片放到150倍以上的电子显微镜下，用解剖刀切割外表的杂物，清理外表杂物后取下最顶的芽尖0.2～0.25mm组织，用接种针接种到分化培养基上培养15～20天得到小植株，所述的分化培养基每升含硝酸钾15～35mg,硫酸镁1～6mg，磷酸二氢铵1～5mg，氯化钙0.5～3mg，硫酸锰10～15mg，硫酸锌0.1～2mg，铳酸铜0.05～0.5mg，氯化钴0.001～0.2mg，维生素B₁0.1～5mg，盐酸吡哆醇0.1～1mg，烟酸0.5～5mg，肌醇10～100mg，蔗糖15～45g，卡拉胶6～10g，生长素0.09～0.25mg，分裂素6BA0.1～0.3mg；

步骤（3），快速增殖：培养15～20天后，将诱导出的小植株切割成0.3～0.5mm后接入新的分化培养基中，多次继代采用分化培养基，在每次转袋过程中，不断淘汰白化苗和污染袋苗，剪除枯黄叶片，经3～5次转袋培养后，得到的小植株再进行壮苗培养；

步骤（4），壮苗培养：将无菌分化增殖获得的小植株接种到壮苗培养基上培养40～60天得到小苗，所述的壮苗培养基每升含蔗糖10～35g，卡拉胶6～10g，a-萘乙酸0.2～5.0mg，吲哚丁酸0.1～3mg，其余为步骤（2）培养基中的成分。

2.如权利要求1所述的一种藿香组织培养快速繁殖的方法，其特征在于步骤（2）分化培养基每升含蔗糖25～30g，卡拉胶8g，生长素0.09～0.25mg，其余为步骤（2）培养基中的成分。

3.如权利要求1所述的一种藿香组织培养快速繁殖的方法，其特征在于步骤（4）壮苗培养基每升含蔗糖30g，卡拉胶8g，a-萘乙酸0.8mg，其余为步骤（2）培养基中的成分。

4.如权利要求1所述的一种藿香组织培养快速繁殖的方法，其特征在于步骤（2）～步骤（4）中所用的培养基pH为5～6，培养温度20～28℃，每天光照8～12小时，光照度800～2500Lx，芽尖为芽苞生长点0.1～0.5mm组织，叶片为顶尖叶片1/2处0.1～0.8mm组织，小植株的高度最好为1～3cm，小苗最好为苗高3～8cm，每株苗有2～8条根，无变异白化苗。

5.如权利要求1所述的一种藿香组织培养快速繁殖的方法，其特征在于步骤（2）～步骤（4）中所用的培养基均分装入薄膜袋中，每袋30ml，分装好后密封、高温消毒15～25分钟，取出放在无菌室降温贮存，在无菌室的超净工作台上接上对应的外植体或小植株后，用封口机把接好种的培养基袋封口，再放到培养室培养，培养基分装的薄膜袋，均为OPP薄膜袋。

6.一种藿香育苗的方法，其特征在于当小苗形成的植株长至3～8cm时，将培养袋苗转移到自然光下炼苗7～14天，然后将其从袋中取出，洗净根部的培养基，轻基质营养杯栽培，经1～2个月生长得到中苗，成为生产栽培的种苗。

7.如权利要求6所述的一种藿香育苗的方法，其特征在于中苗为苗高15cm以上，每株苗有分叉2～5条，有3～8条根以上，须根多，叶片厚浓绿，无病虫，无变异苗白化苗。