[发明专利]阿魏酸酯酶制剂、复合酶制剂以及蛋鸡复合饲料

说明书

本发明提供了一种阿魏酸酯酶制剂，该酶制剂是以阿魏酸酯酶马克斯克鲁维酵母重组菌株，通过高密度发酵获得液体酶，然后加入玉米淀粉、玉米芯粉或麦芽糊精载体进行喷雾干燥制得。本发明提供的阿魏酸酯酶复合酶制剂能够显著提高饲料的利用率，提高蛋白、淀粉以及非淀粉多糖(NSP)的消化率。本发明还提供了一种含阿魏酸酯酶的蛋鸡复合饲料，该复合饲料可以提高蛋鸡的产蛋率，降低蛋鸡的料蛋比。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，涉及酶制剂及其应用，具体涉及一种阿魏酸酯酶制剂、 含有该阿魏酸酯酶制剂的复合酶制剂以及前述酶制剂在制备蛋鸡复合饲料中的应用。

背景技术

非淀粉多糖(non-starch polysaccharides，NSP)是指淀粉以外的多糖，主要有纤维 素、半纤维素、果胶、葡聚糖、菊粉、海藻多糖以及几丁质等，在小麦、大麦玉米等谷物中，NSP以纤维素、半纤维素和果胶为主，是人和动物膳食纤维的一部分。

在饲料中，半纤维素是一类主要抗营养因子，在动物肠道中会与水分子相互结合缠在一 起成为网状胶质结构，增加食糜的黏度，减低脂肪、蛋白质、碳水化合物以及其它营养物的 消化吸收，甚至能够影响动物的健康。在饲料中添加降解非淀粉多糖的水解酶，不仅能够将 降低食糜的黏度，而且非淀粉多糖的降解能够为动物提供额外的营养，改善肠道菌群，从而 提高营养物质消化率、改善动物健康、提高生产性能。

饲料中的半纤维素主要包含木聚糖、甘露聚糖、阿拉伯聚糖以及阿魏酸等，在这些成分 当中，阿魏酸是一个关键的消化拮抗因素：在木质纤维素中它通过酯键将纤维素、木聚糖和 木质素相互紧密交联，从而阻碍酶的水解。半纤维素的降解需要多种酶的协同参与，主要包 括木聚糖酶、甘露聚糖酶、半乳糖苷酶、阿拉伯糖苷酶以及阿魏酸酯酶等等。其中，阿魏酸 酯酶(feruloyl esterases，EC 3.1.1.73)又称为肉桂酸酯酶，是羧酸酯水解酶的一个亚 类，其能够水解阿魏酸等酚酸与半纤维素、木质素等之间的酯键，打破植物细胞壁中的致密 网状结构，使纤维素暴露，提高纤维素的降解率，同时还释放出阿魏酸。

阿魏酸具有很强的抗氧化、抗炎症作用，广泛应用于食品添加剂和药品中，在机体内可 以清除自由基，促进清除自由基的酶的产生，增加谷胱甘肽转硫酶和醌还原酶的活性，有较 强的抗血小板聚集、抗血栓形成、抗心龇缺血等作用，并抑制酪氨酸酶活性，来调节机体生 理机能。若在饲料中添加阿魏酸酯酶，则不仅能够促进非淀粉多糖的水解提高饲料的利用率， 而且能够在酸性条件下水解释放阿魏酸，提高饲料的营养价值。

然而，现有技术中，虽然已经从多种微生物中可以发现或分离得到阿魏酸酯酶，如橄榄 色链霉菌Streptomyces olivochromogenes、荧光假单胞菌Pseudomonasfluorescens、嗜 松青霉Penicillium pinophilum、裂褶菌Penicillium pinophilum以及黑曲霉Aspergillus niger等，但是这些菌株的阿魏酸酯酶表达量较低，其中产酶量最高的菌株黑曲霉表达量仅 为10.6U/mL，并不能达到作为饲料添加剂的需求；目前，国内外也未有将阿魏酸酯酶产品 的应用于饲料添加的报道。

发明内容

本发明是为了解决上述问题而进行的，目的在于提供一种表达量高、能够应用于饲料添 加的阿魏酸酯酶产品，同时提供含有该阿魏酸酯酶产品的蛋鸡复合饲料。

作为一种实施形态，本发明提供了一种阿魏酸酯酶制剂，其特征在于，利用重组表达阿 魏酸酯酶的马克斯克鲁维酵母菌株制备得到。

上述阿魏酸酯酶制剂中还可以具有这样的技术特征，其中，利用重组表达阿魏酸酯酶的 马克斯克鲁维酵母菌株制备的过程包括如下步骤：

i)采用阿魏酸酯酶重组马克斯克鲁维酵母菌株通过高密度发酵获得阿魏酸酯酶液体 酶；

ii)在阿魏酸酯酶液体酶中添加10-20％的载体，该载体为玉米淀粉、玉米芯粉或麦芽 糊精中的一种或任意几种的组合；