[发明专利]一株具有土壤重金属修复作用的天神芽孢杆菌及其应用

权利要求书

1.一种天神芽孢杆菌(Bacillus tianshenii strain)S5，其特征在于，该菌株已于2019年12月23日保藏于中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，地址为：中国，武汉，武汉大学，其生物保藏号为：CCTCC NO:M20191091。

2.如权利要求1所述天神芽孢杆菌(Bacillus tianshenii strain)S5，其特征在于，所述天神芽孢杆菌(Bacillus tianshenii strain)S5的培养基如下：玉米粉5～7.0％；豆粕3～4％；硫酸铵0.2～0.4％；碳酸氢钠0.5～0.7％；碳酸钙0.05～0.2％，余量为水；调pH至6～7，115～125℃条件下灭菌25～35min。

3.如权利要求1所述天神芽孢杆菌(Bacillus tianshenii strain)S5，其特征在于，所述天神芽孢杆菌菌粉制备方法如下：将所述天神芽孢杆菌(Bacillus tianshenli strain)S5接种于斜面培养基进行培养；取培养好的斜面，在无菌条件下取菌株接种于种子液体培养基中，振荡培养获得一级种子液；对一级种子液进行扩大培养获得二级种子液；以0.8～1.2％的接种量取二级种子液接种于液体发酵培养基中，当芽孢率达到90％以上时，收集发酵液，加入轻质碳酸钙后喷雾干燥得到菌粉。

4.如权利要求3所述天神芽孢杆菌(Bacillus tianshenii strain)S5，其特征在于，所述斜面培养中，将菌种一环接种于固体斜面培养基上，在37℃下培养24～30h。

5.如权利要求4所述天神芽孢杆菌(Bacillus tianshenii strain)S5，其特征在于，所述一级种子培养在37℃条件下，180rpm震荡培养18～24h；

或所述扩大培养以1％(v/v)的接种量，将一级种子液接于500mL～1000mL种子液体培养基中，在37℃条件下，震荡培养12～14h，制得二级种子液。

6.如权利要求4所述天神芽孢杆菌(Bacillus tianshenii strain)S5，其特征在于，所述喷雾干燥的步骤中，向发酵液中加入0.67～1.00％轻质碳酸钙；

或所述种子培养基配方如下：4.0％糖蜜，2.0％豆粕、0.7％K₂HPO₄、0.3％KH₂PO₄，0.15％(NH₄)₂SO₄，0.05％柠檬酸钠，0.01％硫酸镁，余量为水，调pH至6.8，121℃条件下灭菌30min。

7.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂，所述菌剂包括权利要求1-7任一项所述的天神芽孢杆菌(Bacillus tianshenii strain)S5和/或菌的培养物。

8.权利要求7所述菌剂为液体菌剂、粉剂或颗粒剂；进一步的为水悬浮剂、可分散油悬浮剂、可湿性粉剂或水分散颗粒剂。

9.权利要求1-6任一项所述菌株、权利要求7或8所述菌剂在重金属土壤修复方面的应用；优选的，所述重金属土壤修复作用为对镉、铅的修复作用。

10.一种复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂由权利要求1-6任一项所述天神芽孢杆菌(Bacillus tianshenii strain)S5和贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)S3或两者的培养物组成；所述贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)S3，已于2020年3月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，其生物保藏号为：CGMCC No.19445。