[发明专利]一种天神芽孢杆菌、其菌剂及在重金属修复领域的应用

权利要求书

1.一株天神芽孢杆菌(Bacillus tianshenii)P46，已于2020年3月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，其生物保藏号为：CGMCC NO.19444。

2.天神芽孢杆菌P46的菌粉，其特征在于，含有权利要求1所述的天神芽孢杆菌P46，其制备方法如下：将所述天神芽孢杆菌P46接种于斜面培养基进行培养；取培养好的斜面，在无菌条件下取菌株接种于种子液体培养基中，振荡培养获得一级种子液；对一级种子液进行扩大培养获得二级种子液；以0.8～1.2％的接种量取二级种子液接种于液体发酵培养基中，当芽孢率达到90％以上时，收集发酵液，加入轻质碳酸钙后喷雾干燥得到菌粉。

3.如权利要求2所述天神芽孢杆菌P46的菌粉，其特征在于，所述斜面培养中，将菌种一环接种于固体斜面培养基上，在37℃下培养24～30h。

4.如权利要求2所述天神芽孢杆菌P46的菌粉，其特征在于，所述一级种子液为在37℃条件下，180rpm震荡培养18～24h获得。

5.如权利要求2所述天神芽孢杆菌P46的菌粉，其特征在于，所述扩大培养以体积比为1％的接种量，将一级种子液接于500mL～1000mL种子液体培养基中，在37℃条件下，震荡培养12～14h，制得二级种子液。

6.如权利要求2所述天神芽孢杆菌P46的菌粉，其特征在于，所述喷雾干燥的步骤中，向发酵液中加入质量百分数为0.67～1.00％轻质碳酸钙。

7.如权利要求2所述天神芽孢杆菌P46的菌粉，其特征在于，所述种子培养基配方如下：4.0％甘蔗糖蜜，2.0％豆粕、0.7％K₂HPO₄、0.3％KH₂PO₄，0.15％(NH₄)₂SO₄，0.05％柠檬酸钠，0.01％硫酸镁，余量为水，调pH至6.8，121℃条件下灭菌30min。

8.如权利要求3所述天神芽孢杆菌P46的菌粉，其特征在于，所述固体斜面培养基为在NB合成液体培养基中添加1.5～2.0％的琼脂粉制备而成。

9.如权利要求2所述天神芽孢杆菌P46的菌粉，其特征在于，所述液体发酵培养基配方为：玉米粉6.0％；豆粕3.5％；硫酸铵0.3％；碳酸氢钠0.6％；碳酸钙0.1％；其余为水；pH＝7.0。

10.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂包括权利要求1所述的天神芽孢杆菌P46或权利要求2-9任一项所述天神芽孢杆菌P46的菌粉。

11.如权利要求10所述的一种菌剂，其特征在于，所述菌剂剂型为液体菌剂、粉剂或颗粒剂。

12.如权利要求11所述的一种菌剂，其特征在于，所述菌剂剂型为水悬浮剂、可分散油悬浮剂、可湿性粉剂或水分散颗粒剂。

13.如权利要求11所述的一种菌剂，其特征在于，所述菌剂中还包括农药学上可接受的辅料，所述农药学上可接受的辅料选自分散剂、润湿剂、崩解剂、粘结剂、消泡剂、抗冻剂、增稠剂、填料和溶剂中的一种或多种。

14.权利要求1所述天神芽孢杆菌P46在重金属土壤修复方面的应用，所述重金属为铅、镉。

15.权利要求2-9任一项所述天神芽孢杆菌P46的菌粉在重金属土壤修复方面的应用，所述重金属为铅、镉。