[发明专利]一种新型冠状病毒IgG抗体的酶联免疫法检测试剂盒

说明书

本发明提供了一种新型冠状病毒IgG抗体的酶联免疫法检测试剂盒，包括抗FITC抗体酶标板、FITC标记新型冠状病毒抗原、辣根过氧化物酶标记鼠抗人IgG单克隆抗体。本发明试剂盒与现有核酸检测试剂盒相比操作简便，高通量，高灵敏度，速度快，成本低，对实验室要求低等。

技术领域

本发明属于免疫分析检测技术领域，尤其是涉及一种新型冠状病毒IgG抗体的酶联免疫法检测试剂盒。

背景技术

冠状病毒属于单股正链RNA病毒，既往已知感染人的冠状病毒有 6种，即HCoV-229E、HCoV-OC43、SARSr-CoV、HCoV-NL63、HCoV-HKU1和MERSr-CoV。新型冠状病毒（2019-nCoV）属于第7种。

新型冠状病毒肺炎是一种急性感染性肺炎，其病原体是一种先前未在人类中发现的新型冠状病毒，即2019新型冠状病毒。经呼吸道飞沫和密切接触传播是主要的传播途径，在相对封闭的环境中长时间暴露于高浓度气溶胶情况中存在经气溶胶传播的可能。患者初始症状多为发热，乏力和干咳，并逐渐出现呼吸困难等严重表现。多数患者预后良好，部分严重病例可出现急性呼吸窘迫综合征或脓毒症休克，甚至死亡。

目前临床实验室的检测方法主要依靠核酸检测，但核酸检测要在有条件和资质的实验室进行，存在检测时间长、样本采集要求高、步骤多、场地和设备要求高等不足，难以大规模开展。而用免疫测定进行抗体检测则可用于对高危人群的筛检，检测新型冠状病毒IgG抗体可用于新型冠状病毒感染肺炎原发感染中后期临床辅助诊断或者流行病学监测，如何实现这一临床辅助诊断，成为亟待解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明旨在提出一种新型冠状病毒IgG抗体的酶联免疫法检测试剂盒，与现有核酸检测试剂盒相比具有操作简便，速度快，成本低，对实验室要求低等特点。

为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种新型冠状病毒IgG抗体的酶联免疫法检测试剂盒，包括抗FITC抗体酶标板、FITC标记新型冠状病毒抗原、辣根过氧化物酶标记鼠抗人IgG单克隆抗体。

优选的，FITC标记新型冠状病毒抗原中的新型冠状病毒抗原包括如表1所示的4种合成多肽或包括如表1所示的4种合成多肽的氨基酸序列的重组抗原，

表1 合成多肽的氨基酸序列

FITC标记新型冠状病毒抗原中的新型冠状病毒抗原可以为具有如表2所示氨基酸序列：

表2重组抗原的氨基酸系列信息

优选的，新型冠状病毒抗原包括4种合成多肽时，4种合成多肽的质量比为（0.5-2）：（0.5-2）：（0.5-2）：（0.5-2）；优选的，1:1:1:1。

优选的，所述FITC标记新型冠状病毒抗原的制备包括以下步骤，

1）将新型冠状病毒抗原装入透析袋中，用0.02-0.1M pH8.5-10的碳酸盐缓冲液，透析1-2h，当新型冠状病毒抗原为合成多肽时，省略该步骤；

2）当新型冠状病毒抗原为重组抗原时，将FITC与新型冠状病毒抗原按摩尔（2-4）:1进行混合，之后用0.02-0.1 M碳酸盐缓冲液于2-8℃透析20-24h，期间换液2-3次；

当使用新型冠状病毒合成多肽时，将FITC与合成多肽按摩尔比1:（1-3）进行混合，避光37℃反应6-12h。

3）将上述步骤2）完成的标记液用0 .01-0.05M PBS 于2-8℃透析24h，加入等体积甘油，-20℃保存。

优选的，还包括TMB显色剂A液和B液、以及终止液；所述终止液为浓硫酸，盐酸，氢氧化钠中的一种。