[发明专利]一种提高脐带间质干细胞抗氧化能力的培养方法有效
申请号: | 202010529580.9 | 申请日: | 2020-06-11 |
公开(公告)号: | CN111635885B | 公开(公告)日: | 2023-08-29 |
发明(设计)人: | 耿倚云;宋芸娟;胡士庶;沈洁;沈艳 | 申请(专利权)人: | 深圳市旷逸生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 深圳市合道英联专利事务所(普通合伙) 44309 | 代理人: | 廉红果 |
地址: | 518000 广东省深圳市前海深港合作区前*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 脐带 间质 干细胞 氧化 能力 培养 方法 | ||
1.一种提高脐带间质干细胞抗氧化能力的培养方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
S1、向无动物成分来源添加的MSCBM培养基中加入一定量的烟酰胺单核苷酸,配制得到NMN的浓度为2~10uM的含NMN的培养基;
S2、按照白藜芦醇和NMN的质量比范围为(5~20):100的比例向所述S1制得的NMN培养基中加入白藜芦醇,制得含NMN和白藜芦醇的培养基;将制得的含NMN和白藜芦醇的培养基对P2至P8代的脐带间充质干细胞冲悬,得到细胞悬液;
S3、调整所述S2得到的细胞悬液中的细胞密度,并将所述细胞悬液接种于细胞培养设备中且置于培养箱中进行扩增培养。
2.根据权利要求1所述的提高脐带间质干细胞抗氧化能力的培养方法,其特征在于,所述S1中,所述含NMN的培养基中NMN的浓度为2μm,5μm或10μm。
3.根据权利要求1所述的提高脐带间质干细胞抗氧化能力的培养方法,其特征在于,所述S3中,所述细胞悬液中的细胞密度为1×106~5×106个/mL。
4.根据权利要求3所述的提高脐带间质干细胞抗氧化能力的培养方法,其特征在于,所述S3中,所述细胞培养设备为细胞培养板或细胞培养瓶,接种于所述细胞培养板或细胞培养瓶中的细胞密度为0.6~1.2×104个/cm2。
5.根据权利要求4所述的提高脐带间质干细胞抗氧化能力的培养方法,其特征在于,所述S3中,所述培养箱为CO2培养箱,所述培养时的温度为35℃~38℃。
6.根据权利要求5所述的提高脐带间质干细胞抗氧化能力的培养方法,其特征在于,所述CO2培养箱中CO2的体积百分浓度为4.5~5.5%。
7.根据权利要求6所述的提高脐带间质干细胞抗氧化能力的培养方法,其特征在于,所述白藜芦醇与NMN的质量比为5:100,10:100或20:100。
8.根据权利要求7所述的提高脐带间质干细胞抗氧化能力的培养方法,其特征在于,所述无动物成分来源添加的MSCBM培养基的具体配置方法为:向MSCBM培养基中加入MSC无血清添加剂EliteGroTM-Advanced,所述添加剂EliteGroTM-Advanced与所述MSCBM培养基的体积比为(2~5):100。
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