[发明专利]菌株安-15、其选育方法及其应用

说明书

本发明提供了一种菌株安‑15、其选育方法及其应用。该菌株安‑15，拉丁名Saccharomyces cerevisiae，保藏编号为CCTCC NO：M 2019643。本发明提供的菌株安‑15属于布拉氏酵母菌株，其具有更好的耐酸、耐胆盐、耐人工胃液及人工肠液能力。

技术领域

本发明涉及微生物领域，具体而言，涉及一种菌株安-15、其选育方法及其应用。

背景技术

布拉氏酵母于20世纪20年代由法国微生物学家Henri Boulard首次发现并分离，后被确认为酿酒酵母的一个亚种，其没有病原性，并具有特殊的生物活性。布拉氏酵母能有效的治疗人和动物的各种腹泻，且未发现不良反应。布拉氏酵母菌进入人和动物肠道后，不仅可以降解致病菌产生的毒素，还能刺激肠道黏膜增强免疫功能，同时调节肠道微生态平衡，阻止病原菌的侵袭。

布拉酵母发挥作用主要环境在人和动物的胃肠环境。在进入胃中要耐受pH2.0～2.5的低pH环境及胃液胃蛋白酶的影响，进入肠道要耐受胆盐及肠液中胰蛋白酶的影响。

公开号为CN104388325A的中国专利中公开了一株饲用布拉氏酵母菌株SH94及其应用，从该专利的布拉氏酵母耐人工胃液实验结果表明，该布拉氏酵母SH94在pH2.0的人工胃液停留2小时后，活菌数有90％，该布拉氏菌株在pH6.8人工肠液停留2小时后活菌数几乎不变。然而，从其实施例看，菌株SH94的耐人工胃液及人工肠液是分别进行的，实际应该连续检测其耐受能力，并针对其连续消化耐受性进行性状改良。且该专利中没有提及菌株SH94的耐人及动物胆盐的能力，仅提及了耐NaCl的能力，此外该菌株在耐酸能力及耐酸时间上也需要进一步提升。

基于上述原因，有必要提供一种耐酸、耐胆盐、耐人工胃液及人工肠液能力更强的布拉氏酵母菌株。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种菌株安-15、其选育方法及其应用，以解决现有技术中布拉氏酵母菌株耐酸、耐胆盐、耐人工胃液及人工肠液能力不足的问题。

为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种菌株安-15，拉丁名Saccharomyces cerevisiae，保藏编号为CCTCC NO：M 2019643。

根据本发明的另一方面，还提供了上述菌株安-15的选育方法，其包括以下步骤：将布拉氏酵母进行连续进化培养，得到进化培养菌株；对进化培养菌株进行常压室温等离子体(ARTP)诱变选育，得到突变株；依次对突变株进行高通量筛选和多次迭代诱变，得到菌株安-15。

进一步地，布拉氏酵母的保藏编号为CCTCC NO：M 2012116。

进一步地，连续进化培养过程中，将布拉酵母接入pH为2.0～3.0的液体培养基，每16～24h转接一次，连续转接进化培养3～6个月，得到进化培养菌株。

进一步地，按重量份计，液体培养基包括葡萄糖3～8％，蛋白胨0.5～2％，磷酸二氢钾0.1～0.3％，硫酸镁0.05～0.2％，其余为水。

进一步地，等离子体诱变选育过程中，处理温度为20～37℃，处理压力为0.8～1.2KPa；优选地，等离子体诱变选育过程中，诱变功率100～140W，进气量10～12SLM，诱变时间为30～60S。

进一步地，高通量筛选及多次迭代的步骤包括：将突变株置于装有选择性液体培养基的高通量孔板中；恒温摇动培养，18～24小时后，用酶标仪测定600nm下的吸光值OD，比较吸光值OD相对较高的菌株进行多次迭代诱变，得到菌株安-15。

进一步地，多次迭代诱变的迭代次数为4～8次。

根据本发明的另一方面，提供了一种上述菌株安-15在制备食品中的应用。

根据本发明的另一方面，提供了一种上述菌株安-15在制备抗腹泻药物中的应用。