[发明专利]采用高速逆流色谱制备钩藤中喜果苷的方法

说明书

本发明属于化学医药领域，其公开了一种采用高速逆流色谱制备钩藤中喜果苷的方法，其步骤如下：(1)取钩藤，提取得粗提物；(2)将粗提物经萃取得乙酸乙酯萃取物；将乙酸乙酯萃取物过硅胶柱，梯度洗脱，回收洗脱液，干燥，得粗品；将粗品通过高速逆流色谱，一次制备得到式1化合物。本发明的方法可以规模化、高效、快速提纯得到喜果苷。并且制备过程中的流动相和固定相可以反复利用，节约了制备成本。

技术领域

本发明属于化学医药领域，具体涉及工业化快速制备中药钩藤中得单体化合物喜果苷的方法。

背景技术

钩藤(Uncariarhynchophylla)，又被称为双钩藤，倒挂刺，鹰爪凤等，为茜草科钩藤属常绿藤本植物。钩藤又分为大叶钩藤(Uncariamacrophylla Wall)，.毛钩藤(UncariahirsutaHavil.)，华钩藤(Uncariasinensis(Oliv.)Havil)或无柄果钩藤(UncariasessilifructusRoxb.)。钩藤的适宜生长环境为温暖湿润、疏松肥沃的土壤，在广东、贵州、广西、福建、江西等均有种植。钩藤的药用部位通常为其带钩的枝条，其味甘苦、微寒，归心包经，具有清热透邪的作用。目前已报道的从钩藤中分离出的化学成分有100多种，包括生物碱类、黄酮类、三萜类和苷类等，其中以生物碱的含量尤为丰富，如钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱等。钩藤的药理作用，如消炎、止痛、降压、抗癌、抗癫痫等，与其化学成分密切相关。

中药成分快速分离纯化技术对于理解中药复杂的物质基础、控制重要质量和发现潜在的活性物质具有重要意义。HSCCC在保证无样品损失、溶剂体系可循环利用、载样量大的前提下，可以快速实现中药化学成分的分离。而且由于其被分离物质与液相固定相之间能够充分接触，使得样品的分离制备量大大提高。是一种理想的工业化制备中药单体物质的手段。该特点使得高速逆流色谱在中药、生物药、生物制品、食品等样品的分离研究中得到广泛应用。

发明内容

基于上述现有技术，本发明提供了一种采用高速逆流色谱制备钩藤中喜果苷的方法，其可以适用于快速工业化制备中药钩藤中喜果苷化合物。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

一种采用高速逆流色谱制备钩藤中喜果苷的方法，其结构式为：

包括以下步骤：

(1)取钩藤，提取得粗提物；

(2)将粗提物经萃取得乙酸乙酯萃取物；

(4)将乙酸乙酯萃取物过硅胶柱，梯度洗脱，回收洗脱液，干燥，得粗品；

(4)将粗品通过高速逆流色谱，一次制备得到式1化合物。

优选的，所述步骤(1)中提取为乙醇冷浸提取。

优选的，所述钩藤与乙醇的质量体积比为：1:10，质量体积比的单位为kg/L。

优选的，所述步骤(2)具体是：将粗提物溶于蒸馏水得混悬液，依次用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，保留乙酸乙酯萃取相，得乙酸乙酯萃取液，将乙酸乙酯萃取液减压浓缩，得乙酸乙酯萃取物。

优选的，所述钩藤与蒸馏水的质量体积比为1:10，质量体积比的单位为kg/L。

优选的，所述步骤(3)中梯度洗脱共分为10个组分，分别命名为Fr.1-Fr.10；取Fr.5回收洗脱液。

优选的，所述乙酸乙酯萃取物过硅胶柱时采用乙酸乙酯与二氯甲烷的混合洗脱体系，乙酸乙酯与二氯甲烷的体积比依次为100:1，99:1，98:2，97:3，95:5，9:1，4:1，7:3，3:2，1:1；每五个柱体积更换一次洗脱体系。