[发明专利]一种T细胞抗原受体、其多聚体复合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种T细胞抗原受体，其特征在于，所述的T细胞抗原受体特异性结合EBV潜伏期膜蛋白LMP2，其中，所述LMP2的结合表位包含SEQ ID NO：5。

2.根据权利要求1所述的T细胞抗原受体，其特征在于，其包含α链的CDR1α-CDR3α和β链的CDR1β-CDR3β；其中，CDR3α的氨基酸序列如SEQ ID NO：37或38所示，或与SEQ ID NO：37或38所示氨基酸序列具有至少80％同源性；CDR3β的氨基酸序列如SEQ ID NO：39或40所示，或与SEQ ID NO：39或40所示氨基酸序列具有至少80％同源性；优选的，CDR1α的氨基酸序列如SEQ ID NO：41所示或与SEQ ID NO：41所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR2α的氨基酸序列如SEQ ID NO：42或与SEQ ID NO：42所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR1β的氨基酸序列如SEQ ID NO：43所示或与SEQ ID NO：43所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR2β的氨基酸序列如SEQ ID NO：44所示或与SEQ ID NO：44所示氨基酸序列具有至少80％同源性；进一步优选的，所述的CDR1α-CDR3α及CDR1β-CDR3β选自下列任一组：

；

更进一步优选的，所述的α链的氨基酸序列如SEQ ID NO：33或34所示，或与SEQ ID NO：33或34所示氨基酸序列具有至少80％同源性；所述的β链的氨基酸序列如SEQ ID NO：31或32所示，或与SEQ ID NO：31或32所示氨基酸序列具有至少80％同源性；最为优选的，所述T细胞抗原受体的氨基酸序列选自SEQ ID NO：22或23所示，或与SEQ ID NO：22或23所示氨基酸序列具有至少80％同源性。

3.一种核酸，其特征在于，所述的核酸编码权利要求1-2任一所述的T细胞抗原受体。

4.一种表达载体，其特征在于，所述的表达载体包含权利要求3所述的核酸。

5.一种宿主细胞或免疫细胞，其特征在于，所述的宿主细胞包含权利要求3所述的核酸或权利要求4所述的表达载体，所述的免疫细胞表达权利要求1-2任一所述的T细胞抗原受体。

6.一种重组T细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)从阳性T细胞克隆得到权利要求3的核酸序列；

2)分离、培养原代T细胞；

3)将步骤1)得到的核酸序列递送至步骤2)所述的原代T细胞中，获得表达权利要求1-2任一所述T细胞抗原受体的重组T细胞。

7.一种T细胞抗原受体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)从阳性T细胞克隆得到权利要求3的核酸序列；

(2)将步骤(1)得到的核酸序列连接至载体骨架，获得表达载体；

(3)将步骤(2)获得的表达载体转化至宿主细胞，然后诱导其表达；

(4)获得T细胞抗原受体。

8.一种多聚体复合物，其特征在于，所述多聚体复合物包含权利要求1-2任一所述的T细胞抗原受体。

9.根据权利要求8所述的多聚体复合物，其特征在于，所述多聚体复合物还包括单体，生物素分子，以及链霉亲和素分子或亲和素分子，其中，所述单体包括MHC分子α链胞外区和β2m链及抗原肽，所述单体与所述生物素分子偶联，所述生物素分子与所述链霉亲和素或亲和素分子结合；优选的，所述的抗原肽包含SEQ ID NO：5，所述的MHC分子选自HLA-A*0201。