[发明专利]表达抗CD22嵌合抗原受体和PD-L1阻断蛋白的细胞的制备方法、表达载体及应用有效
| 申请号： | 202010891848.3 | 申请日： | 2020-08-28 |
| 公开（公告）号： | CN111944850B | 公开（公告）日： | 2023-03-31 |
| 发明（设计）人： | 赵琦;刘婕 | 申请（专利权）人： | 澳门大学 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/62;C12N15/12;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00;A61P35/02 |
| 代理公司： | 成都超凡明远知识产权代理有限公司 51258 | 代理人： | 王晖;刘书芝 |
| 地址： | 中国澳门*** | 国省代码： | 澳门;82 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 表达 cd22 嵌合 抗原 受体 pd l1 阻断 蛋白 细胞 制备 方法 载体 应用 | ||
1.一种药物组合物，其特征在于，其包括
-表达载体或细胞，
-可溶性的单克隆抗体，以及
- 药学上可接受的赋形剂，
其中，所述表达载体插入有编码抗CD22嵌合抗原受体的第一核酸和编码PD-L1阻断蛋白的第二核酸；所述PD-L1阻断蛋白为缺乏PD-1跨膜区和胞内信号区的PD-L1，所述抗CD22嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述PD-L1阻断蛋白的氨基酸序列如SEQID NO.2所示，
所述细胞通过如下步骤制备：将所述表达载体转染宿主细胞以得到所述细胞，以及
所述可溶性的单克隆抗体是抗人PD-L1抗体。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述第一核酸的核苷酸序列如SEQID NO.3所示，所述第二核酸的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，所述表达载体为慢病毒表达载体。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述慢病毒表达载体为pLVX-IRES-Zsgreen慢病毒表达载体。
5.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，在所述表达载体上，所述第一核酸和所述第二核酸均串联有跨膜结构域。
6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述跨膜结构域选自T细胞受体亚基，CD4，CD8或CD28的跨膜结构域。
7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，所述T细胞受体亚基为α亚基、β亚基或δ亚基。
8.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述表达载体上还包括：胞外结构域和胞内结构域。
9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，所述胞外结构域包括铰链；所述胞内结构域包括共刺激信号分子和胞内信号转导结构域。
10.根据权利要求9所述的药物组合物，其特征在于，所述铰链来自CD8α；
所述共刺激信号分子选自人4-1BB的共刺激信号分子、CD27、PD1、ICOS、OX40或B7-H3；所述胞内信号转导结构域为人CD3ζ信号转导结构域，CD3γ，CD5或CD3ε。
11.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述宿主细胞为T细胞。
12.一种如权利要求1-11任一项所述的药物组合物在制备治疗肿瘤的药物中的应用，所述肿瘤为PD-L1阳性或CD22阳性的肿瘤；所述肿瘤为如下肿瘤中的任意一种：淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、白血病和多发性骨髓瘤。
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