[发明专利]miR-328-3p在制备脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂中的应用

说明书

本发明属于生物技术领域，涉及miR‑328‑3p在制备脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂中的应用。本发明提出血清外泌体miR‑328‑3p在脑梗死及脑缺血再灌注预后预测和治疗中的应用，并通过具体试验结果进行了验证，为脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂和试剂盒以及预后药物的研发提供新思路。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及miR-328-3p在制备脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂中的应用。

背景技术

脑梗死（Cerebral Infarction，CI）是危害人类健康的主要疾病之一，26%-43%的脑梗死有进展性。随着医疗水平的提高，脑梗死后的溶栓治疗等改善了病人的预后，但再灌注会加重脑组织原有的缺血性损伤。早期预测脑梗死预后，减少再灌注损伤，是脑梗死患者治疗的关键。

目前临床上尚无早期预测脑梗死及脑缺血再灌注患者预后预测的有效方法。miRNA的异常表达与脑血管病等多种疾病的发生、发展密切相关。而血液外泌体中存在丰富而稳定的miRNA，由于受到外泌体的保护，miRNA能免受酶降解在体液中远距离运输并被稳定地检出，且其表达谱具有明显的特异性。采用高通量测序筛选miRNA并进行RT-PCR验证，有望找到脑梗死及脑缺血再灌注预后预测的标志物，针对相关miRNA致病机制的研究有助于寻找改善预后的治疗方法。

发明内容

本发明针对目前脑梗死及脑缺血再灌注预后预测还没有一种比较实用可靠的预后试剂或方法的问题提出miR-328-3p在制备脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂中的应用。

为了达到上述目的，本发明是采用下述的技术方案实现的：

本发明提供miR-328-3p在制备脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂或试剂盒中的应用，所述miR-328-3p的核苷酸序列为：tggagtgggg gggcaggagg ggctcaggga gaaagtgcatacagcccctg gccctctctg cccttccgtc ccctg。

所述预后预测试剂或试剂盒以miR-328-3p作为预后预测标记物， miR-328-3p水平高表示预后不良。

作为优选，miR-328-3p含量高低通过高通量测序手段和/或RT-PCR进行分析。

作为优选，分析对象为人体外周静脉血血清。

本发明还提出抑制miR-328-3p的物质在制备改善脑梗死及脑缺血再灌注病人预后药物中的应用。

特异性识别miR-328-3p的引物在脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂或试剂盒中的应用，所述引物序列为：正向:5'-CUGGCCCUCUCUGCCCUUCCGUGGAAGGGCAGAGAGGGCCAGUU-3'， 反向: 5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTTACGUGACACGUUCGGAGAATT -3'。

与现有技术相比，本发明的优点和积极效果在于：

本发明提出血清外泌体miR-328-3p在脑梗死及脑缺血再灌注预后预测和治疗中的应用，并通过具体试验结果进行了验证，为脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂和试剂盒以及治疗药物的研发提供新思路。

附图说明

图1 A为差异miRNA火山图，图1B为差异miRNA聚类图。

图2为血清外泌体miR-328-3p在脑梗死患者中的表达和线栓法小鼠大脑中动脉栓塞再灌注术后评分结果图。

图3为 脑组织TTC染色结果和电镜结果。

图4为miR-328-3p agomir对炎症的影响。

具体实施方式