[发明专利]一种改性溶菌酶制剂及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种改性溶菌酶制剂在油田回注水处理中抑制硫酸盐还原菌的应用，所述改性溶菌酶制剂的制备方法包括以下步骤：

（1）将改性剂加入到溶菌酶溶液中，反应得到粗产物；

（2）利用滤膜对上述粗产物进行超滤和浓缩，其次将冷冻干燥后得到的粗酶产物溶于缓冲溶液中，最后经过透析和层析，冷冻干燥得到纯化改性溶菌酶；

（3）将上述纯化改性溶菌酶加入无菌水配成溶液，室温下加入增强剂，搅拌均匀后得到改性溶菌酶制剂；

所述改性溶菌酶制剂由溶菌酶、改性剂和增强剂按照质量比为1：1-4：1-7的比例组成；

其中所述溶菌酶包括来自动植物的溶菌酶以及通过酶制备、分离、纯化或重组方式获得的溶菌酶，所述改性剂为异喹啉或肉桂醛；所述增强剂为羟基乙叉二膦酸钠、氨基三甲叉膦酸钠、乙二胺四甲叉膦酸钠中的一种。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述溶菌酶、改性剂和增强剂质量比例为1：2-3：3-6。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤（1）中，所述反应条件为温度30-38℃，反应时间3-8h，搅拌速度为200-400rpm。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤（2）中，所述的滤膜为PVDF，NC，PVF和PTEE膜中的一种。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤（2）中，所述的超滤用膜分子量10-50万，所述的浓缩用膜分子量5000-10000。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤（2）中，所述缓冲溶液为中性磷酸钠缓冲液或磷酸钾缓冲液。

7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤（2）中，所述缓冲溶液的质量浓度为5-200mmol/L，基于1重量份的溶菌酶，缓冲溶液加入为50-100份。

8.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤（2）中，所述的透析时间为24-48h。

9.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的层析具体步骤如下：取透析后样品液10mL上 Sephadex G-25 柱，采用缓冲液线性梯度洗脱，流速为1-3mL/min，记录仪纸速为3-5cm/min，检测波长为 280 nm，收集具有溶菌酶活性的峰。

10.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用条件为回注水pH5.0-9.0；回注水温度为15-80℃；回注水矿化度为0-200000mg/L。

11.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用工艺如下：

（1）回注水水质水性检测分析，检测分析项目包括pH、温度、矿化度和硫酸盐还原菌含量；

（2）改性溶菌酶制剂浓度的优化，根据杀菌率达到100%筛选出改性溶菌酶制剂的浓度；

（3）改性溶菌酶制剂的投加，在联合站原有流程中药剂投加位置投加改性溶菌酶制剂，投加浓度按步骤（2）中确定的浓度。

12.根据权利要求11所述的应用，步骤（1）中，所述的硫酸盐还原菌含量测试采用绝迹稀释法。

13.根据权利要求11所述的应用，步骤（2）中，所述改性溶菌酶制剂浓度，其与硫酸盐还原菌含量有关，具体关系如下：

14.根据权利要求11所述的应用，步骤（3）中，所述的投加工艺为连续或冲击投加。