[发明专利]基于核酸适配体调控纳米酶催化活性对抗生素的比色检测方法

权利要求书

1.一种基于核酸适配体调控纳米酶催化活性对抗生素的比色检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)BNQDs/CeO₂纳米酶的制备：

(1.1)将硝酸铈、氢氧化钠和水混合并搅拌，在80℃～100℃下进行水热反应，得到CeO₂纳米棒前驱体；

(1.2)将CeO₂纳米棒前驱体重新分散到水中，然后加入氮化硼量子点的水溶液，经搅拌，得到混合溶液；

(1.3)将上述所得混合溶液于150℃～180℃下进行水热反应，得到氮化硼量子点负载的多孔CeO₂纳米棒，即BNQDs/CeO₂纳米酶；

(2)利用核酸适配体功能化BNQDs/CeO₂纳米酶：将上述所得BNQDs/CeO₂纳米酶加入醋酸钠-醋酸缓冲液中，然后将核酸适配体加入含有BNQDs/CeO₂纳米酶的醋酸钠-醋酸缓冲液中进行混合孵育，得到核酸适配体功能化的BNQDs/CeO₂纳米酶；

(3)将上述所得核酸适配体功能化的BNQDs/CeO₂纳米酶分别加入到多个含有不同浓度抗生素的醋酸钠-醋酸缓冲液样品中进行孵育，然后加入H₂O₂和显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺进行反应，得到混合体系，记录反应后各样品在652nm波长处的吸光度值A，得到抗生素浓度与吸光度值A的检测线性关系；

(4)根据上述所得抗生素浓度与吸光度值A的检测线性关系以及含抗生素的待测样品的吸光度值，得到待测样品中抗生素的浓度。

2.根据权利要求1所述的基于核酸适配体调控纳米酶催化活性对抗生素的比色检测方法，其特征在于，步骤(3)中，当核酸适配体功能化的BNQDs/CeO₂纳米酶加入到不含抗生素的醋酸钠-醋酸缓冲液样品中进行孵育，然后加入H₂O₂和显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺进行反应，得到混合体系时，混合体系呈深蓝色，步骤(4)中，当加入含抗生素的待测样品时，混合体系蓝色变浅，由此定性检测待测样品中是否含有抗生素。

3.根据权利要求1所述的基于核酸适配体调控纳米酶催化活性对抗生素的比色检测方法，其特征在于，所述抗生素为卡那霉素，所述核酸适配体具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述卡那霉素浓度与吸光度值A的检测线性回归方程为：

A＝-0.15lg C_KAN+1.09 (1)

式(1)中，A表示吸光度值，C_KAN为待测溶液中卡那霉素的浓度值，该浓度值对应的单位为nM，式(1)的相关系数R²＝0.995，卡那霉素的检测线性范围为0.01nM～100nM，检测限为4.6pM。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的基于核酸适配体调控纳米酶催化活性对抗生素的比色检测方法，其特征在于，步骤(1.1)中，所述硝酸铈与氢氧化钠的质量比为1∶10～15，所述搅拌的时间为1h～2h。

5.根据权利要求1～3中任一项所述的基于核酸适配体调控纳米酶催化活性对抗生素的比色检测方法，其特征在于，步骤(1.2)中，所述氮化硼量子点与CeO₂纳米棒前驱体的质量比为1∶20～30，所述氮化硼量子点的水溶液中，氮化硼量子点的浓度为0.1mg/mL～0.5mg/mL，所述搅拌的时间为2h～4h。

6.根据权利要求1～3中任一项所述的基于核酸适配体调控纳米酶催化活性对抗生素的比色检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述核酸适配体在醋酸钠-醋酸缓冲液中的浓度为0.5μM～1μM，所述混合孵育是在室温下孵育0.5h～1h。