[发明专利]一种双酶级联催化合成手性噁唑烷酮类化合物的方法

权利要求书

1.一种双酶级联催化合成手性噁唑烷酮类化合物的方法，其特征在于：以苯乙烯类化合物和氰酸盐为原料，利用苯乙烯单加氧酶和卤醇脱卤酶两种生物催化剂，通过一锅一步转化合成手性噁唑烷酮类化合物；其中，所述氰酸盐为氰酸钠或氰酸钾；所述一锅一步转化合成的反应条件为：氰酸盐与苯乙烯类化合物的摩尔比为8:1~1:1之间；反应时间为6~24小时；重组苯乙烯单加氧酶大肠杆菌的细胞浓度为5~20 g DCW/L；重组卤醇脱卤酶大肠杆菌的细胞浓度为5~20 g DCW/L；pH为6.0~9.0的缓冲溶液；反应温度为25~45℃；苯乙烯类化合物的浓度为5~50 mmol/L；所述的苯乙烯单加氧酶的两条多肽链的氨基酸序列在NCBI数据库的登录号分别为AAC23718.1和AAC23719.1；所述的卤醇脱卤酶的氨基酸序列在NCBI登陆号为BAN03849.1。

2.根据权利要求1所述的一种双酶级联催化合成手性噁唑烷酮类化合物的方法，其特征在于：所述苯乙烯类化合物和氰酸盐以及两种所述生物催化剂是一次性投入反应器，进行一锅一步转化合成。

3.根据权利要求2所述的一种双酶级联催化合成手性噁唑烷酮类化合物的方法，其特征在于：所述苯乙烯单加氧酶和卤醇脱卤酶是以大肠杆菌为宿主重组表达而得。

4.根据权利要求1所述的一种双酶级联催化合成手性噁唑烷酮类化合物的方法，其特征在于：两种所述生物催化剂均以重组工程菌整细胞形式进行使用。

5.根据权利要求1所述的一种双酶级联催化合成手性噁唑烷酮类化合物的方法，其特征在于：所述一锅一步转化合成的反应条件为：氰酸盐与苯乙烯类化合物的摩尔比为4:1；反应时间为8-12小时；重组苯乙烯单加氧酶大肠杆菌的细胞浓度为5 g DCW/L；重组卤醇脱卤酶大肠杆菌的细胞浓度为10 g DCW/L；pH为8.0的磷酸盐缓冲溶液；反应温度为30℃；苯乙烯类化合物的浓度为10mmol/L。