[发明专利]抗冠状病毒抗体及其应用

说明书

本发明提供了一种抗冠状病毒抗体或其抗原结合片段，以及制备方法和用途。该抗冠状病毒抗体或其抗原结合片段与冠状病毒S蛋白结合的亲和力高，可以用于冠状病毒的检测。

技术领域

本发明涉及抗冠状病毒抗体技术领域，具体涉及抗冠状病毒抗体或其抗原结合片段，以及制备方法和用途。

背景技术

冠状病毒属于套式病毒目冠状病毒科冠状病毒属，在显微镜下呈日冕或皇冠状。其是引起哺乳动物和鸟类疾病的一组相关的RNA病毒。冠状病毒基因组的两端分别包含一个非翻译区(5’UTR和3’UTR)，其中5’端约3/4包含2个大的重叠的开放阅读框ORF1a和ORF1b，主要编码与病毒复制转录有关的酶类等非结构蛋白，3’端约1/4的基因主要编码表面刺突蛋白(S蛋白)、膜蛋白(M蛋白)、小包膜蛋白(E蛋白)及核衣壳蛋白(N蛋白)等主要结构蛋白。

目前，对于冠状病毒的检测，现有非专利文献人冠状病毒核酸检测方法的研究进展(牛培华等，国际病毒学杂志，2016)中公开了对于人冠状病毒的检测主要有核酸检测、血清学检测、抗原检测、病毒分离和电镜检测等方法，并着重对核酸检测进行阐述。

另一非专利文献中东呼吸综合征冠状病毒血清学检测方法研究进展(马苗苗等，中国病毒病杂志，2018)公开了为控制MERS-CoV的流行提供技术参考，总结了国内外关于MERS-CoV血清学检测方法，并具体评价了相对于核酸检测和病毒分离，检测特异性抗体或抗原的血清学方法操作简便、相对成本低、不易污染、易于推广应用，而且对于轻度或无症状的MERS-CoV感染病例，可研究确定病毒的动物来源与传播特性，对流行地区易感动物进行血清学检测可为疫情爆发提供预警与防控策略，更重要的是还可以辅助研究机体对病毒感染的免疫应答过程，为致病机制与疫苗研究提供科学参考。

但是，目前冠状病毒的抗体依然数量很少，检测方法单一且需要数小时，还亟需各科研单位的进一步研发。因此，本申请提供了一种新的抗冠状病毒抗体，其与结合冠状病毒S蛋白结合的亲和力高，特异性强，可用于针对冠状病毒的相关诊断分析和治疗。

发明内容

本发明提供了一种抗冠状病毒抗体或其抗原结合片段，其与冠状病毒S蛋白结合的亲和力高，可以用于冠状病毒(例如uniport编号Q3LZX1、Q3I5J5、Q0Q475、A0A0K1Z074的SARS以及SARS-CoV-2等)的检测。具体方案如下：

本发明的第一方面，提供了一种抗冠状病毒抗体或其抗原结合片段，所述的抗冠状病毒抗体或其抗原结合片段包含重链可变区的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3，以及轻链可变区的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3，其中，

VHCDR1的氨基酸序列包含SEQ ID NO：1所示，VHCDR2的氨基酸序列包含SEQ IDNO：2所示，VHCDR3的氨基酸序列包含SEQ ID NO：3所示，VLCDR1的氨基酸序列包含SEQ IDNO：4所示，VLCDR2的氨基酸序列包含SEQ ID NO：5所示，VLCDR3的氨基酸序列包含SEQ IDNO：6所示(Kabat编码方式)；

或者，VHCDR1的氨基酸序列包含SEQ ID NO：7所示，VHCDR2的氨基酸序列包含SEQID NO：8所示，VHCDR3的氨基酸序列包含SEQ ID NO：9所示，VLCDR1的氨基酸序列包含SEQID NO：10所示，VLCDR2的氨基酸序列包含SEQ ID NO：11所示，VLCDR3的氨基酸序列包含SEQID NO：12所示(Chothia编码方式)。

抗体可包含轻链的两个相同拷贝和重链的两个相同拷贝。各自包含一个可变结构域(或可变区，VH)和多个恒定结构域(或恒定区)的重链通过其恒定结构域内的二硫键相互结合以形成抗体的“柄”。各自包含一个可变结构域(或可变区，VL)和一个恒定结构域(或恒定区)的轻链各自通过二硫键结合与一条重链结合。每个轻链的可变区与其所结合的重链的可变区配对。轻链和重链二者的可变区都包含位于更保守的框架区(FR)之间的三个高变区。