[发明专利]普沙根瘤菌及其在制备水溶性β-1，3葡聚糖中的应用

权利要求书

1.一种普沙根瘤菌，其特征在于其拉丁文名称为Rhizobium pusense，保藏编号为CGMCC No.19764。

2.根据权利要求1所述的普沙根瘤菌在制备水溶性β-1，3葡聚糖中的应用。

3.根据权利要求2所述的普沙根瘤菌在制备水溶性β-1，3葡聚糖中的应用，其特征在于包括如下工艺步骤：

A、将权利要求1所述的保藏编号为CGMCC No.19764的普沙根瘤菌接种到灭菌后且含有碳源、氮源及其它必要营养物质的培养液中；

B、在温度为28℃～32℃条件下通气搅拌发酵；

C、当发酵周期不超过70小时发酵结束制成含有β-1，3葡聚糖的发酵液。

4.根据权利要求3所述的普沙根瘤菌在制备水溶性β-1，3葡聚糖中的应用，其特征在于所述的步骤A的培养液中的碳源选用蔗糖；氮源选自大豆分离蛋白、氨水、硝酸铵、蛋白胨与酵母粉的混合物中的一种或其结合。

5.根据权利要求3所述的普沙根瘤菌在制备水溶性β-1，3葡聚糖中的应用，其特征在于所述的步骤A中培养液含有如下质量百分含量的组份：

蔗糖5.0%～6.0%；大豆分离蛋白0.15%～0.3%；磷酸二氢钠0.1%～0.2%；硝酸钠0.15%～0.3%；硫酸镁0.015%～0.025%；硫酸亚铁0.001%～0.0015%；氯化锌0.0005%～0.001%；消泡剂0.03%～0.05%；pH=6.8～7.5。

6.根据权利要求3所述的普沙根瘤菌在制备水溶性β-1，3葡聚糖中的应用，其特征在于步骤A是将保藏编号为CGMCC No.19764的普沙根瘤菌进行活化处理后接种于发酵培养液，具体条件为：将低温保存、保藏编号为CGMCC No.19764的普沙根瘤菌接种到含有以下质量百分含量原料成分的活化培养基中，在28℃～32℃、180-220转/分钟的条件下活化16小时～24小时；

蔗糖0.8%～1.2%；蛋白胨0.2%～0.4%；酵母粉0.05%～0.12%；磷酸二氢钠0.08%～0.12%；硝酸钠0.2%～0.3%；硫酸镁0.15%～0.25%；硫酸亚铁0.001%～0.0015%；氯化锌0.0005%～0.001%；消泡剂0.005%～0.01%。

7.根据权利要求6所述的普沙根瘤菌在制备水溶性β-1，3葡聚糖中的应用，其特征在于所述的步骤A是将活化后的保藏编号为CGMCC No.19764的普沙根瘤菌经过扩大培养后，按照种子液：培养液的体积百分比为8%～12%的接种量接种于培养液中。

8.根据权利要求7所述的普沙根瘤菌在制备水溶性β-1，3葡聚糖中的应用，其特征在于所述的扩大培养过程包括：

（1）将活化后的保藏编号为CGMCC No.19764的普沙根瘤菌经扩大培养后制成种子液；

（2）将制成的种子液按种子液：发酵液的体积百分比为8%～12%的接种量接入发酵罐内灭菌后的培养液中，进行通气发酵。

9.根据权利要求8所述的普沙根瘤菌在制备水溶性β-1，3葡聚糖中的应用，其特征在于所述的扩大培养过程步骤（1）中制备种子液的工艺条件是：将活化的种子液按质量百分比浓度8%～12%的量接种到含有以下原料组分的培养基中，在28℃～32℃，风量20立方米/小时～100立方米/小时,罐压0.008兆帕～0.12兆帕的条件下培养20小时～30小时；

蔗糖0.8%～1.2%；蛋白胨0.2%～0.4%；酵母粉0.05%～0.1%；大豆分离蛋白0.04%～0.08%；磷酸二氢钠0.08%～0.12%；硝酸钠0.2%～0.3%；硫酸镁0.15%～0.25%；硫酸亚铁0.001%～0.0015%；氯化锌0.0005%～0.001%；消泡剂0.003%～0.005%。