[发明专利]一种从铜藻中提取黑麦草内酯的方法

权利要求书

1.一种从铜藻中提取黑麦草内酯的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

步骤一：清洗，用海水与淡水间隔冲洗铜藻，挑除杂质，并阴干；

步骤二：粉碎，将阴干后的铜藻在80℃的烘箱中烘干，得到干燥的铜藻，并将其粉碎，得到铜藻粉末；

步骤三：提取，将铜藻粉末分散到乙醇和二氯甲烷的混合溶液中，升温到50-60℃，搅拌3-5小时，并过滤，将滤液蒸除溶剂后，得到粗提取物；

步骤四：初步提纯，将粗提取物用中性氧化铝进行柱层析，以二氯甲烷-乙酸乙酯为洗脱剂，并且依次增加乙酸乙酯的浓度进行梯度洗脱，每一梯度洗脱3-5个柱体积，并且收集每个柱体积的洗脱液，并用TLC分析洗脱液中的成分，并收集Rf值为0.6-0.65的组分，合并并浓缩，得到黑麦草内酯粗品；

步骤五：二次提纯，将黑麦草内酯粗品用甲醇溶解，并缓慢加入二氯甲烷，降温至-10℃，使得黑麦草内酯结晶析出，过滤，并用二氯甲烷淋洗滤渣并干燥，即可得到高纯度的黑麦草内酯。

2.根据权利要求1所述的一种从铜藻中提取黑麦草内酯的方法，其特征在于，步骤一中海水与淡水间隔冲洗为先用海水冲洗，后用淡水冲洗，并重复3次。

3.根据权利要求1所述的一种从铜藻中提取黑麦草内酯的方法，其特征在于，步骤三中铜藻粉末与混合溶液的质量体积比为8g：3-5mL；混合溶液由体积比为乙醇：二氯甲烷＝3:1制备而成。

4.根据权利要求1所述的一种从铜藻中提取黑麦草内酯的方法，其特征在于，步骤四中梯度洗脱过程为：100％二氯甲烷→0.8-1.2％乙酸乙酯→6-10％乙酸乙酯→15-20％乙酸乙酯→25-35％乙酸乙酯→40-50％乙酸乙酯→100％乙酸乙酯；TLC分析用硅胶薄层板，在体积比10:1的二氯甲烷-甲醇混合液作为展开剂下进行。

5.根据权利要求1所述的一种从铜藻中提取黑麦草内酯的方法，其特征在于，步骤五中黑麦草内酯粗品与甲醇的质量体积比为1g：3-5mL；按体积比甲醇：二氯甲烷＝3-5:1。