[发明专利]一种产维生素B12的菌株及其应用

说明书

本发明涉及维生素发酵技术领域，具体公开一种产维生素B12的菌株及其应用。所述产维生素B12的菌株的菌种保藏号为CCTCC NO:M2020913。本发明提供的产维生素B12的菌株具有高产维生素B12的活性，突破了传统维生素B12发酵单位低的瓶颈。且该菌株的遗传稳定性好、发酵过程简单易操作，为维生素B12的工业化生产提供了一种更优质的菌种。

技术领域

本发明涉及维生素发酵技术领域，尤其涉及一种产维生素B12的菌株及其应用。

背景技术

维生素B12又叫钴胺素，是一种含有3价钴的多环系化合物，其中4个还原的吡咯环连在一起变成为1个咕啉大环，也是唯一含金属元素的维生素。高等动植物自身不能合成或制造维生素B12，自然界中的维生素B12都是通过微生物合成的。维生素B12在体内参与制造骨髓红细胞，具有防止恶性贫血，防止大脑神经受到破坏等重要作用，广泛应用于医药和食品工业。

微生物通过复杂的途径产生维生素B12，为了维持稳定的维生素B12浓度，其生物合成和转运通过核糖开关在转录或翻译水平上受到调节。常用的产维生素B12的菌株有P.denitrificans和P.shermanii等，这些菌株的遗传工具相对较少，且发酵过程复杂，因此菌株发酵工程一直关注于随机诱变和发酵过程的优化等策略。而目前利用上述策略获得的产维生素B12的菌株经发酵获得的维生素B12的平均单位最高也仅保持在290-305mg/L之间，这成为微生物发酵生产维生素B12无法突破的瓶颈。

发明内容

针对现有发酵生产维生素B12存在的上述问题，本发明提供一种产维生素B12的菌株及其应用，其具有高产维生素B12的优势，在适宜条件下，维生素B12的发酵单位可达到340mg/L。

为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：

一种产维生素B12的菌株，其菌种保藏号为CCTCC NO:M2020913。该菌株属于黏着剑菌(Ensifer adhaerens)，于2020年12月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为武汉大学。

相对于现有技术，本发明提供的产维生素B12的菌株具有高产维生素B12的活性，突破了传统维生素B12发酵单位低的瓶颈。且该菌株的遗传稳定性好、发酵过程简单易操作，为维生素B12的工业化生产提供了一种更优质的菌种。

本发明还提供所述产维生素B12的菌株的发酵培养基，该培养基包括以下质量配比的组分：玉米浆65-75g/L，氧化镁0.4-0.6g/L，甘油4.5-5g/L，七水合硫酸镁1-1.4g/L，硫酸铵0.8-1.2g/L，尿素0.4-0.6g/L，磷酸氢二铵0.6-0.8g/L，磷酸二氢钾0.6-0.8g/L，硫酸锌0.06-0.08g/L，碳酸钙1.74-1.78g/L，液糖44-48g/L，甜菜碱6-10g/L，凝胶均质剂0.8-1.2g/L，七水合氯化钴0.02-0.04g/L，5.6二甲基苯丙咪唑0.02-0.04g/L和消沫剂0.22-0.26g/L。

上述优选的产维生素B12的菌株的发酵培养基的各组分配比，为所述产维生素B12的菌株发酵生产维生素B12提供了所需的多种营养物质，可长时间维持发酵液中维生素B12的高生产效率。

优选的，该培养基包括以下质量配比的组分：玉米浆70g/L，氧化镁0.5g/L，甘油4.8g/L，七水合硫酸镁1.2g/L，硫酸铵1g/L，尿素0.5g/L，磷酸氢二铵0.7g/L，磷酸二氢钾0.7g/L，硫酸锌0.07g/L，碳酸钙1.76g/L，液糖46g/L，甜菜碱8g/L，凝胶均质剂1g/L，七水合氯化钴0.03g/L，5.6二甲基苯丙咪唑0.03g/L和消沫剂0.24g/L。

上述优选的发酵培养基的各组分配比可以进一步满足产维生素B12的菌株发酵生产维生素B12营养需求，进而进一步提高维生素B12的发酵产量。