[发明专利]一种稳定多肽类蛋白靶向抑制剂及其用途

说明书

本发明提供了一种稳定多肽类蛋白靶向抑制剂，其氨基酸序列如下所示，Ac‑Q‑S‑Q‑Q‑F‑K‑N‑M_q‑W‑R‑L‑L‑D‑Q‑N‑NH₂，其中，M_q为本发明还提供了上述的一种稳定多肽类蛋白靶向抑制剂在制备用于抑制MDM4蛋白中的用途。通过核磁和二级质谱等证明本发明的多肽可以与MDM4蛋白上的赖氨酸共价结合，从而影响MDM4蛋白与p53蛋白的结合活性。同时，细胞增殖实验也证明本发明的多肽可以抑制乳腺癌细胞的增殖。

技术领域

本发明属于生物工程领域，涉及一种多肽，具体来说是一种稳定多肽类蛋白靶向抑制剂及其用途。

背景技术

在目前所知的人类的肿瘤基因中，p53作为抑癌基因对于细胞内稳定以及微环境的保持发挥着非常重要的作用，从而也被成为“基因组卫士”。当体内的胞内环境受到破坏，如DNA损伤等，转录因子p53会对于相关基因进行相应的调控，从而使其进行表达来促进对于细胞的修复。p53在对于阻止细胞恶性转化方面有着至关重要的作用，目前在人类肿瘤中，发现将近50％的肿瘤是因为p53基因突变或失活而使得p53蛋白无法发挥正常的功能。进一步可以证明，p53对于生命活动正常运转有着保护的作用。

MDM2和MDM4是p53蛋白的负调节因子，也是p53泛素化和降解的主要因子。其主要是通过连接到p53的N-端转录激活的结合区域，直接对p53造成抑制作用。MDM2还有对E3泛素连接酶的活性，可以直接通过蛋白酶系统对于p53造成泛素化和降解。科学家发现，其过量表达对于p53的功能造成抑制，在目前许多已知的肿瘤中都可以发现。

MDM4是p53最重要的负性调节因子之一。在人类癌症中，科学家们发现MDM4的水平升高会导致抑癌蛋白p53的失活。该蛋白的结构和MDM2蛋白结构类似，但是其发挥的作用不同，MDM2是通过将p53进行降解来发挥其作用，而MDM4是通过结合其转录激活区域，从而对p53进行抑制作用。并且发现在乳腺癌中MDM4的含量异常过度，也使得MDM4逐渐成为一个潜在的抗肿瘤治疗靶点。

2010年，Sawyer教授课题组利用RCM关环策略，设计了一条ATSP-7041的多肽抑制剂，该多肽抑制剂在前有报道的多肽序列的基础上进行了优化，从而使其达到与靶点MDM2和MDMX结合在纳摩尔级，也是目前报道的活性最高的双靶向MDM2和MDMX的多肽抑制剂。2017年，李子刚教授课题组利用该课题组开发的手性诱导螺旋多肽的策略构建了靶向p53-MDM2/MDMX的多肽抑制剂。具有螺旋构型的多肽MeR和PhR均表现出比多肽MeS和PhS具有更好的靶点结合能力和细胞穿膜能力。证明了多肽的二级结构和生物活性有着紧密的联系。并且研究表明，该多肽具有良好的肿瘤干细胞杀伤作用，为后续针对肿瘤干细胞的多肽抑制剂提供了新的思路。

2016年，王磊教授课题组设计了多肽共价抑制剂可以有效阻断p53-MDM4之间的相互作用。该研究将已报道的SAH-p53-8序列中的22位点的亮氨酸替换为含有方向基团的磺酰氟化合物。利用全碳侧链稳定p53多肽螺旋的同时，在多肽的侧链引入磺酰氟化合物，该多肽与MDM4结合的同时，侧链上的磺酰氟基团会与蛋白上的赖氨酸在空间上靠近，从而触发共价反应，形成蛋白-多肽共价体。该研究表明，此策略可以使得SAH-p53-8的抑制效果增加10倍，并且系统的对于该苯环上的修饰位点进行研究，最终确定最优的化学修饰基团。

发明内容

针对现有技术中的上述技术问题，本发明提供了一种稳定多肽类蛋白靶向抑制剂及其用途，所述的这种稳定多肽类蛋白靶向抑制剂及其用途要解决现有技术中的药物对于治疗乳腺癌的效果不佳的技术问题。

本发明提供了一种稳定多肽类蛋白靶向抑制剂，其氨基酸序列如下所示，Ac-Q-S-Q-Q-F-K-N-M_q-W-R-L-L-D-Q-N-NH₂，M_q为(SEQ ID NO.2所示)。

进一步的，其结构式如下所示，