[发明专利]一种家用型检测芹菜过敏原的高灵敏试剂盒、其检测方法和应用

说明书

本发明公开了一种家用型检测芹菜过敏原的高灵敏试剂盒、其检测方法和应用，所述高灵敏试剂盒包括：试纸条：NC膜上的检测线上包被鼠抗芹菜单克隆抗体1，浓度为0.1～0.5mg/ml，质控线上包被羊抗小鼠IgG，浓度为2～8mg/ml；试纸条由上至下为吸水纸、NC膜，样品垫，固定于PVC胶板上；其中，吸水纸和样品垫与NC膜重叠部分为2mm；金标微孔：将芹菜金标抗体与冻干稀释液的混合液加入到低吸附酶标板的微孔后进行冻干得到；其中，所述芹菜金标抗体是用链霉亲和素金标复合物和生物素标记牛血清白蛋白金标复合物组成的网状结构来标记生物素化芹菜抗体2而制备得到。本发明的检测试剂盒，使用便利，检测灵敏度高，特异性强，极大地提高了家庭检测芹菜过敏原的便捷性。

技术领域

本发明涉及过敏原检测方法技术领域，尤其涉及一种家用型检测芹菜过敏原的高灵敏试剂盒、其检测方法和应用。

背景技术

食物过敏也称为食物变态反应或消化系统变态反应、过敏性胃肠炎，是由于某种食物或食品添加剂等引起的IgE介导和非IgE介导的免疫反应，而导致消化系统内或全身性的变态反应。在我国患有过敏性疾病的人高达两亿之多，而其中90％左右是由食品过敏引起的。芹菜作为一种常见蔬菜，属于八大类致敏原之一，它能引起严重的过敏反应，严重威胁着芹菜过敏人群的生命健康。目前国内外对芹菜过敏性疾病没有彻底有效的根治方法，防止芹菜过敏的最有效手段是避免食入含有芹菜的食物。

目前芹菜过敏原检测方法主要有电泳法、色谱法、酶联免疫实验(ELISA)、生物免疫传感器、基于质谱的蛋白质组学(LC-MS/MS)和聚合酶链式反应技术(PCR)等。其中，电泳法、色谱法和酶联免疫实验法是基于蛋白的传统的芹菜检测方法，往往只能针对单个蛋白进行分析，虽然发展的较为成熟但尚不能满足需求；基于质谱的蛋白质组学，可以同时高通量、高灵敏度的快速检测多种食物过敏原。聚合酶链式反应技术(PCR)是以DNA/RNA为基础发展起来的一项检测技术，经高温变性、低温退火及中温延伸等三步环节组成一个循环周期，达到目的基因特异性扩增的目的。PCR技术分为普通PCR和实时荧光定量PCR两种。普通PCR技术主要用于定性检测，检测结果需电泳验证，容易受交叉污染产生假阳性结果。而实时荧光PCR通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测，从而实现对起始模板的定量分析，虽然与传统PCR相比，它具有特异性强、准确度高、PCR污染少、自动化程度高等优点，但是操作较为复杂，成本高，耗时长，对实验者的技能要求高等。

以上现有的芹菜过敏原检测方法均对操作人员的技术水平要求较高且需要很复杂精密的仪器设备作为配合，有些方法耗时长，有些方法成本相对较高，种种苛刻要求使以上方法走进家庭成为不可能。

因此，现有的芹菜过敏原检测方法有待进一步改进。

发明内容

针对现有芹菜过敏原检测方法的操作难度高、耗时长、对操作人员技术要求高、不易走入家庭的问题，本发明提供了一种家用型检测芹菜过敏原的高灵敏试剂盒、其检测方法和应用，该方法在胶体金免疫学方法基础上改良金标微孔得到的一种高效检测芹菜过敏源的新方法。

为解决上述问题，本发明提供以下技术方案：

第一方面，本申请公开了一种家用型检测芹菜过敏原的高灵敏试剂盒，其包括：

试纸条：NC膜上的检测线上包被鼠抗芹菜单克隆抗体1，浓度为0.1～0.5mg/ml，质控线上包被羊抗小鼠IgG，浓度为2～8mg/ml；试纸条由上至下为吸水纸、NC膜，样品垫，固定于PVC胶板上；其中，吸水纸和样品垫与NC膜重叠部分为2mm。

金标微孔：将芹菜金标抗体与冻干稀释液的混合液加入到低吸附酶标板的微孔后进行冻干得到；

其中，所述芹菜金标抗体是用链霉亲和素金标复合物和生物素标记牛血清白蛋白金标复合物组成的网状结构来标记生物素化芹菜抗体2而制备得到。