[发明专利]编码新型冠状病毒的结构蛋白的核酸分子以及新型冠状病毒疫苗

说明书

本发明公开了一种编码新型冠状病毒的结构蛋白的核酸分子以及新型冠状病毒疫苗，涉及基因工程技术领域。本发明公开的核酸分子其碱基序列如SEQ ID NO.1‑4中的任意一者所示。本发明提供的核酸分子经过密码子优化，能够更高效地表达新型冠状病毒的结构蛋白，为新型冠状肺炎疫苗的开发奠定了基础。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，具体而言，涉及一种编码新型冠状病毒的结构蛋白的核酸分子以及新型冠状病毒疫苗。

背景技术

2019新型冠状病毒于2020年1月12日被世界卫生组织正式命名为2019-nCoV，其基因组序列也被相关科学家分析出来并发布于NCBI。但目前新型冠状病毒野生型的E（smallenvelope），M（membrane），N（nucleocapsid）和S（Spike）等四种结构蛋白的基因序列在真核细胞中的蛋白表达量十分低，使得新冠肺炎的疫苗生产变的更加困难。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种编码新型冠状病毒的结构蛋白的核酸分子以及新型冠状病毒疫苗。本发明提供的核酸分子经过密码子优化，能够更高效地表达新型冠状病毒的结构蛋白，该核酸分子可用于制备结构蛋白、新型冠状病毒样颗粒以及相关疫苗。

本发明是这样实现的：

一方面，本发明提供一种编码新型冠状病毒的结构蛋白的核酸分子，其碱基序列如SEQ ID NO.1-4中的任意一者所示。

其中，SEQ ID NO.1编码E蛋白，SEQ ID NO.2编码M蛋白，SEQ ID NO.3编码N蛋白，SEQ ID NO.4编码S蛋白。

本发明通过对野生型E蛋白，M蛋白，N蛋白和S蛋白的四种基因的核苷酸序列分别进行密码子优化，优化后得到的核酸分子序列能够在真核生物细胞中高效表达；利用本发明提供的核酸分子，能够快速、大量地制备新型冠状病毒的E蛋白、M蛋白、N蛋白和S蛋白4种结构蛋白，为新型冠状肺炎的疫苗生产奠定了基础。

另一方面，本发明提供一种载体，其含有如上所述的核酸分子。

在可选的实施方案中，所述载体为pCI或 pCDNA3.1(+)。

在可选的实施方案中，所述核酸分子位于所述载体的KpnI和NotI酶切位点之间。

需要说明的是，本领域技术人员可以根据需要，选择合适的载体，无论何种载体，只要其含有本发明上述的核酸分子即属于本发明的保护范围。

另一方面，本发明提供一种重组细胞，其含有如上所述的核酸分子，或者含有如上所述的载体。

另一方面，本发明提供一种新型冠状病毒的结构蛋白的制备方法，其包括：将如上所述的载体转染宿主细胞进行表达，从培养产物中提取分离得到所述结构蛋白。

在可选的实施方案中，所述宿主细胞为真核生物细胞。

进一步地，在可选的实施方案中，所述真核生物细胞选自HEK293T细胞。

本发明的宿主细胞包括但不限于HEK293T细胞，其他类型被转染后也能够产生上述结构蛋白的细胞也属于本发明的保护范围。

另一方面，本发明提供如上所述的核酸分子以及如上所述的载体在制备新型冠状病毒样颗粒或新型冠状病毒疫苗中的应用。