[发明专利]包裹腺苷的脂质体

说明书

本文提供了一种包裹腺苷的脂质体。脂质体可以由鞘磷脂或鞘磷脂与1,2‑二肉豆蔻酰‑sn‑甘油‑3‑磷酸胆碱(DMPC)的组合或鞘磷脂与1,2‑二肉豆蔻酰‑sn‑甘油‑3‑磷酸甘油(DMPG)的组合或鞘磷脂、DMPG与DMPC的组合形成。包裹腺苷的脂质体可以用于诱导软骨再生，治疗骨关节炎，减轻关节疼痛，和/或减缓、阻止和/或逆转与骨关节炎相关的进行性结构组织损伤，或治疗骨关节炎、类风湿性关节炎、急性痛风性关节炎和/或滑膜炎。脂质体可以释放腺苷最长达两周。

相关申请的交叉引用

本申请要求2019年4月3日提交的美国临时专利申请第62/828,916号的优先权，其公开内容纳入本文。

背景技术

骨关节炎(OA)是一种以软骨流失为特征的疾病，也是最常见的关节炎类型，影响到全世界1.51亿人，包括美国和其他工业化国家近10％的人口。年龄、先前的创伤、肥胖和遗传是造成这种退行性关节疾病的风险因素之一。OA的发病率随着年龄的增长而增加，由此产生的疼痛、关节功能和活动能力的丧失、社会孤立和生活质量的大幅降低使得OA成为一种具有高度医学和社会影响的疾病。OA可以影响任何关节，但是最常见的是影响膝、髋和手。OA在膝关节的发病率最高，无论女性(47％)还是男性(40％)都是如此。目前的治疗方案不尽如人意，不能解决根本问题。治疗大多是姑息性的，包括使用非甾体抗炎药(如布洛芬)、麻醉性镇痛药、运动和针灸。FDA也已经批准了一些OA的具体治疗方法，包括皮质类固醇(抗炎剂)和透明质酸(润滑、止痛)，所有这些都是通过关节内(IA)注射来进行的。虽然这些可注射药剂能缓解症状，但是没有一个具有恢复性。

嘌呤系统在维持软骨平衡方面起到关键作用。腺苷作用于其A2A受体(A2AR)，是维持软骨细胞和软骨平衡的重要自分泌稳态因子。腺苷是一种内源性生理调节剂，其细胞内和细胞外的浓度受氧消耗、细胞压力和线粒体功能的严格控制。细胞外的腺苷主要来自ATP的水解(主要但不完全通过胞外酶CD39和CD73)，并且通过激活G蛋白偶联受体(A1R、A2AR、A2BR和A3R)来介导其作用。这些腺苷受体在进化上是高度保守的，它们的表达和功能也趋于保守。腺苷长期以来一直被认为可以调节炎症和免疫反应，以往的研究已经证明了腺苷及其受体在成骨细胞、破骨细胞和骨髓稳态中的重要性。先前的研究表明，腺苷受体也能调节软骨细胞的生理和病理，以应对啮齿动物、马、牛和人类软骨细胞的炎症刺激，但是涉及的具体受体尚未确定。尽管马的嘌呤代谢与其他物种不同，但是内源性腺苷的除去(通过添加腺苷脱氨酶)或A2AR的阻断会导致马软骨外植体的软骨退化，因为存在于大多数物种的淋巴细胞、血浆和细胞外液中的腺苷脱氨酶不存在于马的淋巴细胞或血清中。据报道，在化学诱导的OA模型中，A3R的刺激能减少OA的进展，这主要是因为A3R激动剂的抗炎作用。但是，腺苷的半衰期仅有几秒钟。

发明内容

本公开提供了一种可注射制剂。本文还公开了制造和使用该可注射制剂的方法。可注射制剂包含脂质体和生理盐水，其中，脂质体为亚稳态并包裹腺苷。

附图简要说明

为了更全面地了解本公开的性质和目的，参考以下与附图相关联的详细描述。

图1所示为由RgnA09形成的脂质体的腺苷保留。

图2所示为由RgnA09形成的脂质体悬浮液的显微镜图像。

图3所示为由RgnA09形成的脂质体的近似直径的直方图。

图4所示为由RgnA10形成的脂质体的腺苷保留。

图5所示为由RgnA10形成的脂质体悬浮液的显微镜图像。

图6所示为由RgnA10形成的脂质体的近似直径的直方图。

图7所示为预脂质体冻干物。

图8所示为现有技术的脂质体悬浮液的显微镜图像。脂质体悬浮液含有明显的结晶化腺苷的迹象，并且据信球形物是油。