[发明专利]阿尔茨海默氏病的基因疗法

权利要求书

1.一种基因疗法载体，其包括可操作地连接到包括编码APOE2的开放阅读框和3'非翻译区的核酸序列的第一启动子以及包括用于抑制APOE4 mRNA的一个或多个RNAi核酸序列的分离的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的载体，其中所述载体包括所述核苷酸序列。

3.根据权利要求2所述的载体，其中所述核苷酸序列插入所述开放阅读框的5'或3'。

4.根据权利要求2所述的载体，其中所述核苷酸序列插入所述开放阅读框的5'和3'。

5.根据权利要求1所述的载体，其中所述核苷酸序列位于不同的载体上。

6.根据权利要求1到5中任一项所述的载体，其中所述分离的核苷酸序列包括可操作地连接到所述一个或多个RNAi核酸序列的第二启动子。

7.根据权利要求1到6中任一项所述的载体，其中所述基因疗法载体是病毒载体。

8.根据权利要求5所述的载体，其中所述不同的载体是病毒载体。

9.根据权利要求7或8所述的载体，其中所述病毒载体是AAV、腺病毒、慢病毒、疱疹病毒或逆转录病毒载体。

10.根据权利要求9所述的载体，其中所述AAV是AAV5、AAV9或AAVrh10。

11.根据权利要求1到10中任一项所述的载体，其中所述APOE4是人APOE4。

12.根据权利要求1到10中任一项所述的载体，其中所述APOE2是人APOE2。

13.根据权利要求1到13中任一项所述的载体，其中所述第一启动子是PolI启动子。

14.根据权利要求6所述的载体，其中所述第二启动子是PolIII启动子。

15.根据权利要求1到14中任一项所述的载体，其中所述分离的核苷酸序列包括一种或多种miRNA的核酸，所述miRNA包括所述RNAi核酸序列中的两个或更多个。

16.根据权利要求1到14中任一项所述的载体，其中所述RNAi包括包含多个siRNA序列的siRNA。

17.根据权利要求1到16中任一项所述的载体，其中APOE2的所述开放阅读框包括多个相对于SEQ ID NO:6的沉默核苷酸取代。

18.根据权利要求17所述的载体，其中所述APOE2开放阅读框中的所述多个沉默核苷酸取代不在所述分离的核苷酸序列中的所述RNAi核酸序列中。

19.根据权利要求16、17或18所述的载体，其中所述开放阅读框中至少50％、60％、70％、80％或90％的密码子具有沉默核苷酸取代。

20.根据权利要求16、17或18所述的载体，其中所述开放阅读框中至少5％、10％、20％、30％或40％的密码子具有沉默核苷酸取代。

21.根据权利要求1到20中任一项所述的载体，其中被抑制的所述APOE4具有与包括SEQID NO:10的多肽具有至少80％、85％、90％、95％或更多氨基酸序列同一性的序列。