[发明专利]miR-142-5p在制备治疗慢性粒细胞白血病药物中的应用

说明书

本发明属于医药技术领域；具体涉及miR‑142‑5p在治疗慢性粒细胞白血病(CML)中的作用。本发明发现miR‑142‑5p在CML细胞中表达下调，恢复miR‑142‑5p的表达可抑制CML细胞增殖，诱导细胞凋亡。同时，本发明通过对过表达miR‑142‑5p的K562细胞进行转录组测序分析，找到靶mRNA。miR‑142‑5p通过抑制PI3K/AKT信号通路调节CML细胞生长。本发明阐明了一种基于miRNA与PIK3CD相互作用的分子机制，因此，miR‑142‑5p可用来辅助治疗CML。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，涉及miR-142-5p在治疗CML中的应用。

背景技术

慢性粒细胞白血病(CML)是一种由造血干细胞恶性转化引起的骨髓增生性 疾病，其特征性改变为9号染色体c-abl原癌基因易位到22号染色体BCR导致 BCR-ABL基因的费城(philadelphia chromosome，Ph)染色体的形成。BCR-ABL 融合基因编码的P210^bcr-abl融合蛋白具有持续性激活的酪氨酸激酶活性使下游多 条信号通路持续性磷酸化激活，如Ras、磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)， 信号转导和转录激活剂(STATs)以及控制凋亡信号等，继而影响细胞增殖分化和 凋亡，引发CML和大约30％的急性淋巴细胞白血病(ALL)。酪氨酸激酶抑制 剂(TKIs)是目前治疗CML的一线药物，极大程度缓解了CML病人病情，但是服 用TKI存在不良的药物反应以及存在依赖BCR-ABL激酶(例如，BCR-ABL激酶 结构域的点突变和复合突变、BCR-ABL基因过表达)的耐药性以及不依赖 BCR-ABL激酶(例如，CML干细胞的存在和代偿生存途径等)的耐药性，因此， 寻找新的CML治疗靶点具有重要意义。

miRNA是一类单链，由高等真核生物基因组编码的非编码小RNA。miRNA 通过与mRNA3’-非编码区(3’-UTR)结合，负向调节mRNA稳定性和翻译效率， 对生物的发育，分化，凋亡，增殖和造血功能具有重要的调节作用。miRNA表 达异常较常见于实体瘤和血液系统疾病中，大量研究证实miR-142具有造血特异 性，对造血干/祖细胞谱系的形成和分化至关重要，是造血系统中细胞生命活动 主要调节因素，Theresa等人研究表明，miR-142-5p表达降低影响CML病人对伊 马替尼(IM)治疗的响应。因此，探究miR-142-5p在CML中的作用，为临床治 疗慢性粒细胞白血病提供科学依据。

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)属丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，可以磷酸化激活蛋 白激酶B(PKB/AKT)的活性，进而激活下游多种效应分子表达，对肿瘤的发生 发展与侵袭转移起着重要作用。根据组成结构及作用不同的底物分子，PI3K分 为I型、II型、III型三类，其中I型中的PI3Kδ(PIK3CD)主要调控白细胞中信号 转导，是治疗急性淋巴细胞白血病等其他恶性血液瘤的重要靶点。此外，抑制 PI3K表达可显著降低人骨肉瘤细胞、胃癌细胞的增殖，诱导细胞凋亡，因此抑 制PI3K的表达可作为抗肿瘤治疗的有效策略。

发明内容

发明人比较GEO数据库中CML病人miRNA表达谱，筛选出差异性表达的 miR-142-5p，并通过体外实验研究发现恢复miR-142-5p的表达可以诱导CML细胞 凋亡、抑制其增殖。重要的是，通过对恢复表达miR-142-5p的K562细胞进行转 录组测序，找到miR-142-5p靶mRNA，miR-142-5p通过下调PI3K的表达进而抑制 PI3K/AKT信号通路，抑制K562细胞增殖，基于以上研究成果完成本发明。

为了实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

第一方面，本发明提供了miR-142-5p作为慢性粒细胞白血病治疗靶点的应用。

第二方面，本发明提供了miR-142-5p在制备抑制慢性粒细胞白血病药物中的 应用。

本发明的第三个方面，提供一种提高miR-142-5p表达和/或活性提高的物质 在以下1)-7)至少一种中的应用：