[发明专利]超长基因在植物中快速表达的方法有效
申请号: | 202110018664.0 | 申请日: | 2021-01-07 |
公开(公告)号: | CN112662702B | 公开(公告)日: | 2023-05-12 |
发明(设计)人: | 徐莺;谢桂兰;田银帅;时小东;刘曦南北;陈放 | 申请(专利权)人: | 四川大学 |
主分类号: | C12N15/83 | 分类号: | C12N15/83;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/82 |
代理公司: | 成都东恒知盛知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 51304 | 代理人: | 罗江 |
地址: | 610064 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 超长 基因 植物 快速 表达 方法 | ||
1.一种超长基因在植物中快速表达的方法,其特征在于,包括以下步骤:
超长基因拆分位点的选择;将拆分后的基因片段分别与表达载体连接,构建重组表达载体;将构建的重组表达载体共同转化植株中,即得;
所述表达载体为烟草脆裂病毒;
所述超长基为GUS基因或RsTT8基因;GUS基因编码的氨基酸序列,如SEQ ID NO.1所示;RsTT8基因的氨基酸序列,如SEQ IDNO.6所示;
将GUS基因拆分的方法:分别在距离GUS蛋白N端的第257个氨基酸赖氨酸K和第258个氨基酸丝氨酸S中间拆分,拆分成前后两部分;或者在第366个氨基酸谷氨酸E和第367个氨基酸丙氨酸A中间进行拆分,拆分成前后两部分;
RsTT8基因的拆分方法为:从RsTT8蛋白的第291个氨基酸丝氨酸S和第292个氨基酸谷氨酰胺Q中间进行拆分;
将GUS基因或RsTT8基因拆分后的前后两部分分别连接到烟草脆裂病毒TRV2表达载体中,共同转化植株。
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