[发明专利]一种石花菜的组织培养及其定植方法

说明书

本发明属于藻类研究领域，公开了一种石花菜的组织培养及其定植方法，主要包括对原材料的选取准备、消毒切段、附着基的消毒准备、接种，在适宜的光照、温度及含有附着基的培养基条件下培养，获得附着于素色棉麻布的石花菜幼苗，用小扎带穿过布片上沿与苗绳连接扎牢，将苗绳的两端通过大扎带与定植框架连接，使苗绳绷直；定植框架的四个角连接浮球，使定植框架悬浮于水面以下10‑20cm，苗绳及挂养的苗种始终保持于水体表层，可使苗种均匀受光，促进其生长，本定植框架结构简单，挂苗方便，成本低，还可适用于拟鸡毛菜等其他海藻的苗种养殖。

技术领域

本发明属于藻类研究领域，尤其涉及一种石花菜的组织培养及其定植方法。

背景技术

石花菜(Gelidium amansii)隶属于红藻门、真红藻纲、石花菜目、石花菜科、石花菜属，是一类重要的经济海藻。它的藻体呈紫红色，植株直立丛生，分支羽状扁平互生或对生，固着器假根状。它含有丰富的胶质，是制取琼胶的优质原料。其他海藻，如江蓠、拟鸡毛菜、紫菜虽然也能制取琼胶，然而就其色泽、透明度、硬度、口感及质量而言都不及石花菜琼胶制品好，国内外不断增大的需求与自然资源的不足的矛盾使石花菜的人工栽培成了亟待解决的问题。虽然也可以利用孢子及其他方法育苗，但没有根本解决苗种来源问题，仍需要采收自然生长的种藻，不是长久之计。最好的方法是采用无性繁殖的方法快速获得大量的苗种。

组织培养技术是一种较成熟的可以在短时间内获得大量幼苗的技术，目前对于大型海藻的组织培养的研究多集中于红藻门和褐藻门种类的海藻，且取得了一定的成果，石花菜的组织培养工作主要还处于对组培流程技术上的开发和创新。而附着基在藻类的繁殖中有着重要的作用，特别是对像石花菜这种具有假根的藻类。在有性繁殖上，人工育苗大都需要附着基，特别是在孢子的诱导释放的过程中，附着基得到了广大利用。在无性繁殖上，附着基也有被用于实验和工厂化生产，一般是用于生出假根的处理，但是在石花菜属上成功生出假根的例子不多。例如中国专利申请号为200910231251.X的专利申请公开了一种石花菜组织培养苗种培育方法。该专利文献中使用的石花菜小块经破碎机破碎后又用200目筛绢收集而得，所获得的藻段长度约1mm，且选取的培养基中未添加植物激素，所以石花菜藻段经30～40天的培养后，所获得的苗种仍然较小仅是出芽状态。再如中国专利申请号为201210484151.X的专利申请公开了一种石花菜的组织培养方法。该专利文献中培养基配方较为繁琐，且接种密度较低，不易扩大规模培养。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术存在的缺点和不足，在苗种培育过程中利用附着基质，提供一种规模化组织培养石花菜苗种和苗种定植的方法。

为了解决上述问题，本发明采用的技术方案如下：

一种石花菜的组织培养及其定植方法，以素色棉麻布做为石花菜的附着基，进行组织培养与定植。

经过实验发现，选用素色棉麻布做为石花菜的附着基，能显著提高石花菜的附着率和出芽率，克服过去石花菜的组织培养与定植困难的问题。使用素色棉麻布作为苗种附着基质，确保苗种长出假根后可牢固附着在附着基质上，便于后期挂苗。

优选的，包括：

A、苗种的选取与暂养：用毛刷将石花菜在消毒海水中反复刷洗，再将其用无菌海水冲洗，然后置于培养箱中充气暂养；

B、苗种的消毒与切断：取生长状况良好的石花菜主枝或分枝作为原材料，用毛刷在消毒海水中反复刷洗，在无菌海水中超声处理，再消毒后用无菌海水冲洗，切段备用，获得段状石花菜；

C、附着基的选取与处理：选用素色棉麻布作为附着基质，将其裁剪成与无菌培养皿底部直径大小一致后，煮沸并灭菌，烘干后放凉备用，获得素色棉麻布附着基；

D、接种：在无菌培养皿中加入培养基与所述素色棉麻布附着基，然后将所述段状石花菜分散于所述素色棉麻布附着基上，进行密封培养；