[发明专利]7-二乙胺基-3-乙酰基香豆素衍生物及其合成方法和应用

权利要求书

1.一种7-二乙胺基-3-乙酰基香豆素衍生物，其特征在于，结构式为Probe 2所示：

2.如权利要求1所述的7-二乙胺基-3-乙酰基香豆素衍生物Probe 2的合成方法，其特征在于，步骤如下：

(1)按摩尔比为1：1将7-二乙胺基-4-羟基-3-乙酰基香豆素和4-甲基苯甲醛在无水乙醇中混合，搅拌下加入少量的哌啶，将混合物回流48小时；冷却至室温，过滤沉淀物并用乙醇洗涤，然后真空干燥以获得橙色固体化合物，即(E)-7-(二乙氨基)-4-羟基-3-(3-(对甲苯基)丙烯酰)-2H-色烯-2-酮；

(2)按摩尔比为1：3将(E)-7-(二乙氨基)-4-羟基-3-(3-(对甲苯基)丙烯酰)-2H-色烯-2-酮和4-肼基苯甲酸在无水乙醇中混合，并加入少量的冰乙酸，混合物搅拌回流4h；冷却至室温后，过滤沉淀物并用无水乙醇洗涤，然后真空干燥以获得黄色固体，即4-(3-(7-(二乙氨基)-4-羟基-2-氧代-2H-色烯-3-基)-5-(对甲苯基)-4,5-二氢-1H-吡唑-1-基)苯甲酸。

3.如权利要求1所述的7-二乙胺基-3-乙酰基香豆素衍生物Probe 2在非疾病诊断或治疗的ClO^-检测中的应用。

4.一种非疾病诊断或治疗的检测ClO^-的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)、用二甲基亚砜(DMSO)配制2mM权利要求1所述的Probe 2的荧光探针储备液；

(2)、将2mL的pH＝7.4的PBS缓冲溶液和10μL荧光探针储备液加到一个荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，随着ClO^-的加入，520nm的荧光强度逐渐减弱，荧光呈“turn-off”型变化；

(3)、以ClO^-浓度为横坐标，以荧光强度F_520nm为纵坐标绘制图，得到ClO^-的工作曲线；线性回归方程为：y＝-303.7x+3578.6，x的单位为10^-6mol/L。

5.如权利要求1所述7-二乙胺基-3-乙酰基香豆素衍生物Probe 2在制备细胞中ClO^-检测试剂中的应用。

6.如权利要求1所述7-二乙胺基-3-乙酰基香豆素衍生物Probe 2在制备动物活体ClO^-检测试剂中的应用。