[发明专利]一种基于多通道光纤共振谱仪检测牛奶中三聚氰胺和双酚A的方法

说明书

本发明公开了一种基于多通道光纤共振谱仪检测牛奶中三聚氰胺和双酚A的方法，S1.取牛奶标准溶液分别加入三聚氰胺抗体和双酚抗体，制成样品孵化标准溶液：使多通道光纤共振谱仪的SPR传感器表面羧基化；分别固定在光纤SPR传感器表面活化的BPA‑BSA和带有BSA的三聚氰胺包被原；将样品孵化标准溶液分别通入样品池中进样检测，得到偏移量‑三聚氰胺浓度及双酚A浓度的二元二次方程；取待检测样品前处理制成待检测样品溶液，通入样品池中进样检测，测定出偏移量带入的二元二次方程中计算得出待检测样本中三聚氰胺和双酚A的含量。利用多通道光纤共振谱仪，基于间接竞争法利用SPR免疫传感测定待检测样品中双酚A和三聚氰胺的浓度，实时快速检测多种物质。

技术领域

本发明属于食品检测技术领域，尤其是涉及一种基于多通道光纤共振谱仪检测牛奶中三聚氰胺和双酚A的方法。

背景技术

随着人们生活水平的提高，消费的牛奶量显著提高。近年来，在奶粉或牛奶中发现化工原料三聚氰胺，三聚氰胺影响人身健康。双酚A是制造环氧树脂、聚碳酸树脂、聚苯乙烯树脂的主要原料，又是用于酚醛树脂、聚氯乙烯、抗氧化剂等的稳定剂，不少研究表明，暴露于双酚A环境中的三聚氰胺会引发多种健康问题，例如焦虑、短期失忆、肥胖、糖尿病和心血管疾病，为了保证人们的健康，需要对牛奶及其他饮食中三聚氰胺和双酚A的含量进行控制。

目前，三聚氰胺(Melamine,MEL)和双酚A(Bisphenol,BPA)的检测方法主要包括高效液相色谱法、气相色谱法、离子色谱法、气质联用和液质联用，上述方法虽然检测准确，但需要复杂的前处理，检测仪器昂贵，检测成本高，难以满足大量样品的快速检测需求，并且无法同时检测出牛奶中的三聚氰胺和双酚A。

利用表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance，SPR)生物光学仪器检测牛奶中的三聚氰胺和双酚A残留物是一种快捷、灵敏的技术手段，国内外有多篇论文及专利报道了包括牛奶在内的不同体系下，三聚氰胺或双酚A的检测方法。但未见同时检测牛奶中三聚氰胺和双酚A的报道。目前公开的检测三聚氰胺和双酚A的方法中，是对待测样品的两步孵育，将对多种残留物的检测转化为对同一标记物的测量，孵育步骤复杂。

因此，为了解决上述技术问题，需要一种检测成本低，适用于大量且快速检测牛奶中三聚氰胺和双酚A的检测方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种快速实时检测多种物质、检测成本低、检测结果准确的基于多通道光纤共振谱仪检测牛奶中三聚氰胺和双酚A的方法。

本发明的技术方案如下：

一种基于多通道光纤共振谱仪检测牛奶中三聚氰胺和双酚A的方法，包括以下步骤：

S1.取牛奶标准溶液，加入磷酸缓冲盐溶液按质量百分比1:25、1:50、1:100、1:200、1:500、1:1000稀释，并向稀释后的混合液中分别加入20μg/mL的三聚氰胺抗体和双酚抗体，孵化5分钟，制成样品孵化标准溶液：

S2.将多通道光纤共振谱仪的SPR传感器一和SPR传感器二的表面清洗干净，使SPR传感器表面羧基化；

S3.使用固定在光纤SPR传感器一表面活化的羧基连接固定双酚A-牛血清蛋白溶液(BPA-BSA)，固定在光纤SPR传感器二表面活化的羧基连接带有BSA的三聚氰胺包被原；